液质分析肽的氨基酸序列
具体的检测方法包括飞行时间质谱(TOF-MS)、离子阱质谱(IT-MS)、四极杆质谱(Q-MS)等等。二、利用液质联用技术进行肽的氨基酸序列分析在肽的氨基酸序列分析中,液质联用技术通常采用串联质谱(MS/MS)的方式。在MS/MS中,选定的肽离子在第一步质谱的基础上再经过碰撞诱导解离(CID),产生一系列的碎片离子,这些碎片...
环肽的序列测定方法
②质谱测定:通过质谱仪对生成的小肽段进行测定。③数据分析:根据质谱数据,结合酶解特异性,推断出环肽的序列。(2)优点:可以处理较大的环肽,酶解步骤简单。(3)缺点:需要选择合适的酶,且酶解产物的复杂性可能增加数据解析难度。环肽的序列测定通常需要综合多种方法,根据样品的特性和实验需求选择最适合的技术。化学...
四川大学耿佳/陈路开发新的方法,实时检测20种氨基酸
铜离子与组氨酸残基结合后,氨基酸与铜纳米孔复合物之间的可逆配位可以产生明确的电流信号,可以检测所有20种蛋白质原性氨基酸,2种带PTMs的氨基酸(O-磷酰-L-丝氨酸(P-S)和Nε-乙酰基-L-赖氨酸(Ac-K))和1种非天然氨基酸(S-羧甲基-L-半胱氨酸(CMC))。此外,通过使用外肽酶分析肽水解产物的组成,鉴定了10种不...
精度达90%的从头肽测序,一种深度学习驱动的串联质谱分析方法
液相色谱串联质谱法是高通量鉴定蛋白质的首选方法。为此,蛋白质首先被消化成肽,其质荷比(m/z)在第一质谱中确定。接下来,选定的肽沿着其主链键断裂,生成一系列肽片段,其m/z比可以在第二个质谱中识别。原则上,该光谱允许通过读出相同离子系列的连续峰之间的m/z差异来重建肽序列。在实践中,由于缺少峰、...
【CEM】Fmoc-His(Boc)-OH在基于Fmoc的固相肽合成中的应用
1-42Beta淀粉样蛋白的合成序列是出了名的困难,需要使用特殊的偶联试剂,即使在严苛条件下,产物纯度通常也过低,无法进行分析和纯化。12与常规合成方法不同,HE-SPPS即便在未优化的条件下也能获得木及高的粗纯度。我们比较了His(Trt)和His(Boc)在50°C下偶联10分钟以及90°C下偶联2分钟的情况。His(Boc)将总合成...
生物活性肽:小分子助力大健康产业
在制备出生物活性肽后,还要对其进行分离,以获得纯度更高的生物活性肽(www.e993.com)2024年9月8日。目前普遍采用的分离方法包括膜分离法、凝胶过滤色谱法、离子交换色谱法和反相高效液相色谱法等。在制备和分离出生物活性肽后,还需对特定氨基酸序列进行鉴定和表征,以进一步证实其功能性。马生军介绍,目前质谱分析是最常用且最有效的生物活性肽鉴定...
空间代谢组学:单细胞空间代谢流分析新方法
为了验证本方法,研究人员检测了常氧-低氧培养的鼠肝癌细胞混合样本。通过对氨基酸同位素峰的定量分析,发现13C标记的棕榈酸(M>0)主要在正常细胞中检出,而缺氧细胞中的棕榈酸以未标记状态(M+0)为主。通过GFP标记结果的对照,证明了本方法可以通过同位素峰分布有效识别不同培养状态的细胞。
关于疫苗抗原:糖基化对质量和性能的影响
用于释放的N-聚糖的分离方法可适用于O-聚糖分析。与N-聚糖相反,O-聚糖释放方法最常通过β-消除以化学方式进行。一些化学方法允许将UV/荧光还原末端标签掺入O-聚糖,并促进色谱方法中的检测。O-聚糖也适合全甲基化序列。对于单糖分析,通常使用HPLC和气相色谱/质谱法,例如USP<210>单糖分析中所述。
【陈巍学基因】视频:PACE 噬菌体辅助基因连续进化方法
2号蛋白与1号蛋白有4个氨基酸的差异,与3号蛋白有3个氨基酸的差异。作者让Bt蛋白先演化到能与2号蛋白结合,再演化到能与3号蛋白结合。用这个中间状态的2号蛋白来做一下过渡,分解BT蛋白演化差异的办法,就是“垫脚石”策略。
Nature子刊:黄硕团队首次通过纳米孔实现20种蛋白质氨基酸和翻译后...
蛋白质是生命活动的执行者,由20种天然存在的蛋白质氨基酸构成。与高歌猛进的DNA测序技术相比,高灵敏、高通量的蛋白质测序技术的发展严重滞后,目前仅Edman降解法和质谱法能做到蛋白质测序。然而,Edman降解法的序列分析长度有限,质谱法的检测限和动态范围阻碍了低丰度蛋白质的分析鉴定和新型生物标志物的发现。