梅毒水平旋转仪|振荡器可支持多种梅毒检测方法 减少人为操作误差
蛋白酶K消化:加入适量的蛋白酶K,消化样品中的蛋白质。加入缓冲液:根据实验需要,加入特定的缓冲液,调节反应条件。沉淀核酸:加入无水乙醇等沉淀剂,通过离心将核酸沉淀下来。洗涤:用适当的缓冲液洗涤沉淀物,去除杂质。洗脱:用洗脱缓冲液将纯化后的核酸从吸附柱或膜上洗脱下来。三、注意事项操作规范:严格遵守实...
纯化生物素修饰蛋白纯化、优势、应用
加样:将含有生物素修饰蛋白的样品溶液加到亲和素或链霉亲和素柱中。生物素化蛋白会特异性结合到柱上。洗涤去除非特异性结合物:用洗脱缓冲液(通常为含盐的缓冲液)清洗柱子,去除未结合的杂质和非特异性结合的蛋白质。洗脱洗脱生物素化蛋白:使用含有生物素的洗脱缓冲液(通常为含有较高浓度生物素的缓冲液)或...
胶原蛋白纯化工艺开发及优化
此工艺的纯化目的是将胶原蛋白的单体蛋白和多聚体蛋白分开,如图2所示,原样中有明显的单体蛋白和多聚体蛋白存在,通过使用TH-S填料,在11%B洗脱条件下,此工艺能够成功得到高纯度的蛋白单体样品,此外,TH-S填料具有高刚性基质、高耐压性能,能够用于高流速、大体积处理量的工艺开发,达到缩短操作周期,提高产率的目的。表...
iMeta | 北大深圳医院桂耀庭组揭示弱精子症患者精浆微生态的动态...
在完成精液采集和临床评估后,根据青岛市市立医院生殖医学科制定的指导方案,通过密度梯度法从精浆中分离精子,该过程需要对样本进行特定处理,并将所需溶液在预热培养箱中平衡过夜,每位患者约需准备4ml溶液。为了便于分离,我们配制了浓度分别为80%和40%的密度梯度离心液(K-SISG-50,WilliamA.CookAustralia,Bloom...
腺病毒的下游纯化方案
4、捕获:腺病毒的层析纯化中,由于病毒颗粒表面带有大量的负电荷,第一步通常使用强阴离子交换的Q填料来对腺病毒进行捕获,采用NaCl洗脱,通常腺病毒在0.4-0.6MNaCl浓度时被洗脱下来,洗脱后腺病毒在高盐缓冲液中。5、精纯:精纯时通常会选用4FF凝胶过滤来进行纯化,将残留的小分子杂质全部去除,上样一般在5-10%,同...
博格隆Diamond Protein L亲和层析填料纯化抗体片段案例分享
在洗脱步骤可以通过pH线性梯度洗脱,优化出合适的洗脱pH范围(www.e993.com)2024年11月15日。对于具有挑战性的抗体或抗体片段,纯化中通过优化洗脱缓冲液浓度,可以进一步去除洗脱产品中的聚集体等相关杂质[2]。在位清洗如果洗脱产品收率异常,建议在CIP之前先进行再生。在用NaOH进行CIP之前,建议先用中性pH溶液平衡层析柱,避免低pH下缓冲液与高pHNaOH...
枣芽红茶功效学试验技术报告
精密称定取阳府井枣芽红茶、普洱茶、滇红茶、蜀红茶、铁观音茶、正山小种茶等样品粉末各10g,按1∶25的比例加入70℃预热的70%甲醇,水浴浸提,冷却至室温,抽滤,滤渣同法重复浸提2次,合并滤液,浓缩至原体积的15%~20%。将上述浓缩液采用氯仿3∶1萃取1次,弃去氯仿层,将水萃取层浓缩至原体积的5%,适量纯...
内毒素亲和去除填料 Purose Endotoxin-Removal及其应用
本实验采用PrePackPuroseEndotoxin-Removal5ml预装柱,样品为大肠杆菌破胞液,上样后蛋白流穿,内毒素与填料结合。在20mMPB,不同的NaCl浓度(0.15M、0.30M、0.50M、0.75M、1.00M),pH=7的缓冲液下测定该填料对内毒素吸附量,同时用20mMPB,2MNaCl洗脱液洗脱,并测定填料对于蛋白结合情况。
抗狂犬病毒感染“植物源”单克隆抗体:效力比较
然后将粗提液离心并澄清,上清液用蛋白A的亲和层析柱进一步纯化。简而言之,将粗裂解物装载到填充有蛋白A珠的柱上(Expedeon,剑桥,英国)。洗涤蛋白质,使用pH2.7的洗脱缓冲液洗脱重组E559和62-71-3单克隆抗体,并立即中和至最终pH7.4。使用Amicon通过超滤浓缩纯化的蛋白质??超离心过滤器(德国达姆施塔特默克公司)。
酶的分离纯化方法介绍
引导产生沉淀的方法有:离子交联;加入带相反电荷的聚合物;加入带相反电荷的疏水基团;改变pH值,诱导产生疏水沉淀;温度诱导产生沉淀。亲和结合:将亲和配基加入到含有目的物蛋白质的溶液中,调节好有关沉淀的条件,使之有利于亲和结合。洗涤:为经过处理的粗制液中发生亲和沉淀可能会发生非特异性结合,尤其是使用带电的聚合...