【前沿资讯】fut8、atm和brca1基因敲除细胞提供癌症治疗新视角
研究人员使用CRISPR-Cas9系统在Swan71细胞系中敲除BRCA1基因,生成了BRCA1基因敲除(BRCA1KO)细胞,通过感染Swan71细胞与含有miR-182过表达构建的慢病毒颗粒,使miR-182在细胞中过表达。结果显示,与野生型细胞相比,BRCA1KO细胞显示出显著增加的HMGA2mRNA和蛋白水平;miR-182的过表达导致BRCA1蛋白水平下降,HMGA2蛋白...
先康达生命 “细胞治疗一站式服务” 全面开通,您想要的这里有!
公司严格按照ISO、GMP质量管理体系进行研发生产运营,不仅为全球基因和细胞治疗领域科学家、医疗单位和高校研发机构提供慢病毒包装(>>点击了解服务详情)、动物平台服务(>>点击了解详情),还推出了检测、蛋白生产、细胞株构建服务。检测服务先康达生命拥有专业的技术团队,推出检测服务,检测标准参考国内、欧洲、美国标准,检...
实现大量CAR-T细胞的高效制备,武大团队研发等渗电转手段,为非病毒...
在遗传层面上,他们在cGAS敲除或STING敲除的小鼠T细胞中,验证了渗透压通过作用于cGAS-STING这个分子通路影响DNA递送和细胞死亡,借此提供了遗传学证据。与慢病毒递送构建的CAR-T细胞相比,利用等渗电转缓冲液构建的CAR-T细胞,在释放细胞因子时具备更强的能力,在小鼠荷瘤模型中的杀肿瘤效果更好...
【干货分享】基因敲除常用转染方法及其对比
慢病毒法允许将基因敲除体系中的Cas9蛋白单独分离出来先表达,这为余下的gRNA、筛选基因、重组模板等元件的导入方法提供了更多的设计和选择空间,在稳定表达Cas9蛋白的细胞系上进行基因敲除比瞬时转染Cas9进行基因敲除的效率更高。但慢病毒法转染会在敲除靶基因的同时引入新的基因,转染的外源基因是随机整合,存在影响其他基...
PLoS Pathog. | 冠状病毒 nsp5 通过切割 POLDIP3 广谱地拮抗宿主...
同时,与未敲除细胞(WT)相比,POLDIP3基因敲除对细胞活力没有显著影响(图3D)。此外,通过Westernblotting验证POLDIP3KO细胞系在不同的传代间是遗传稳定的(图3E)。图3缺失POLDIP3的IPEC-J2基因敲除细胞系的建立结果四、POLDIP3KO细胞促进PDCoV感染作者接下来用PDCoV感染POLDIP3-/-或WT细胞,以评估POLDIP3在...
...克雷伯菌|新动向|基因组|文库|资讯|筛选|前沿|载体|肺炎|病毒|...
简单地说,基于CRISPRa和敲除文库的慢病毒载体来修饰HEK293和HEK293T细胞(www.e993.com)2024年7月27日。然后扩增这些细胞群,并通过转染整合的慢病毒载体基因组。并重复连续转导和转染的过程。对可能抑制或增强慢病毒载体生产的靶基因的引导RNA(gRNAs)进行了富集,并通过下一代测序(NGS)进行了鉴定。虽然还需要更多的工作来测试在这个筛选中确定的...
Nature子刊:上海交通大学朱军/蔡瑜团队:神经胶质瘤有前景的治疗靶点
在P1胶质瘤细胞中,通过使用慢病毒shRNA实验性降低RBPJ表达导致ORC6表达在mRNA和蛋白质水平上均降低。相反,通过慢病毒构建物提高RBPJ表达导致ORC6表达增加。值得注意的是,本研究发现,在各种胶质瘤组织和原代/永生化胶质瘤细胞中,RBPJ蛋白与ORC6启动子区域的结合强度增强。因此,RBPJ-ORC6启动子增强的结合可能代表了人类...
【转载】数据发布 | 博腾生物基因编辑服务平台,高效赋能基因编辑...
基因编辑方案设计及稳转株构建技术团队不断提升优化平台能力,在多个细胞系(包括Tcell、HSC和iPSC)、不同基因编辑方式(敲除、敲入)和多个位点同时编辑的应用场景中,都获得了高水平的编辑效果。案例A:在T细胞中实现稳定和高效的基因编辑效果案例A展示了不同批次下在T细胞不同基因靶点的CRISPR编辑数据。经过对CRISPR...
英美相继批准!是否会加速基因编辑疗法时代的齿轮转动?
第二代TALEN作为ZFN的替代品,具有与第一代基因编辑技术相近的切割效率,细胞毒性较低,构建也相对容易。第三代基因编辑技术CRISPR/Cas9是基于原核生物低于外来病毒及质粒DNA的一种适应性免疫系统开发而来的,主要是利用Cas9蛋白在人工设计的小向导RNA(sgRNA)/向导RNA(guideRNA)导向下,通过碱基互补配对,到达不同的靶...
外泌体每周速递030|巨噬细胞|胰腺|外泌体|-健康界
为避免因后续在细胞表面表达抗GPC3的scFV而产生CNV自聚体现象,导致可能的eFT-CNV收集失败,故敲除GPC3。进一步,用慢病毒感染细胞,使其依次表达抗GPC3的scFv和工程化的病毒膜融合蛋白。需注意的是,该工程化的膜融合蛋白不具备和靶分子结合的能力,但保留了促膜融合能力。其后,物理性挤压构建成功的HEK293细胞收获eFT-...