生物素标记伊氏锥虫kDNA探针的探针特点
生物素标记:生物素是一种小分子维生素,具有与亲和素(如链霉亲和素)高度特异和稳定的结合能力。通过化学方法将生物素分子标记到kDNA探针上,可以实现探针的特异性识别和检测。kDNA特性:kDNA是伊氏锥虫动基体中的一种特殊DNA,具有高度的重复性和复杂的结构,是伊氏锥虫的重要特征之一。利用kDNA作为探针的靶标,可以实...
分子互作|蛋白与蛋白、核酸、小分子互作检测技术介绍、应用及资料...
DNA/RNAPulldown技术是通过生物素标记的DNA或者RNA探针先和Streptavidin琼脂糖珠/磁珠结合,再与细胞裂解液进行孵育,形成磁珠-核酸探针-蛋白复合物,再对蛋白进行洗脱和鉴定。??技术特点能够真实的反映细胞内蛋白质和核酸的结合情况;实验操作简单;不需要特殊仪器。??实验步骤1、探针固定:生物素标记的DNA探针...
DNA pull down试剂盒
该技术将生物素标记的DNA片段结合在链霉亲和素磁珠上,再与细胞核蛋白孵育,纯化出与DNA片段互作的蛋白,洗涤洗脱得到的蛋白产物,做western-blot检测特定蛋白是否与靶DNA片段结合;做质谱鉴定即可筛选出与DNA片段可能互作的蛋白信息(如具体某个或某些转录因子/组蛋白等)。DNAPULLDOWN实验流程产品描述:广州如期生物技...
傻傻分不清?DNApull-down来啦!
DNApull-down实验首先针对靶标区域设计特异性DNA探针,探针经过脱硫生物素标记,跟偶联在磁珠上的链霉亲和素结合;细胞核提取物与磁珠-DNA探针孵育,作用蛋白质分子可以和DNA探针特异性结合;纯化出与靶DNA片段结合的蛋白复合体,经过洗涤可以将非特异性结合蛋白质去除;最后,经洗脱液洗脱,得到目的DNA探针-蛋白质复合物,再...
核酸蛋白互作:RNA/DNA pull down,CHIRP
其中,RNA/DNApulldown是研究体外条件下RNA或DNA与蛋白互作的重要技术。该技术通过体外转录目的RNA的一部分或全长,用生物素标记转录产物,再与链霉亲和素磁珠孵育使之固定在磁珠上,用以“pulldown”互作蛋白,纯化的产物蛋白经特定抗体的western-blot实验,可验证某种蛋白与目的RNA/DNA是否有相互作用;纯化的蛋白经质...
别再被“垃圾DNA”骗了!三大非编码RNA狼狈为奸,携手促癌!
接下来,研究人员试图寻找该分子发挥作用的具体分子机制(www.e993.com)2024年9月7日。借助生物信息学预测软件,研究人员筛选了可能与circRTN4结合的miRNA,随后通过荧光素酶报告分析、miRNApulldown、生物素标记等多种实验手段证实了PDAC细胞circRTN4与miR-497-5p存在相互作用,并且circRNA通过经典的“sponge”(吸附)效应,抑制miR-497-5p的功能。
Nat. Methods | PROBER技术用于检测活细胞中与可编程特异性DNA...
接下来,作者也将PROBER与DNApulldown法进行了对比,GO分析表明,通过DNApulldown鉴定到的大多数蛋白与RNA结合有关,而PROBER鉴定到的蛋白质与转录控制有关。最后,作者将PROBER技术应用于了hTERT启动子突变体相互作用蛋白的鉴定。hTERT被发现在多种癌症中会产生单个位点突变(C250T、C228A和A161C),作者克隆了这些...
传说中的RNAPULLDOWN是啥?
RNApull-down是检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间相互作用的主要实验手段之一。使用体外转录法标记生物素RNA探针,然后与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合,从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后,通过westernblot实验检测特定的RNA结合蛋白是否与RNA相互作用。质谱实...
Nature子刊Oncogene:国自然热点之“外泌体糖基化”研究该如何开展...
标记的RNA探针由GenePharma合成。将经过或不经过RNaseR消化的总RNA注射到2%琼脂糖凝胶的不同泳道上,并通过毛细管转移转移到Hybond-N+膜。杂交温度为58°C,并与生物素标记的寡核苷酸探针一起孵育过夜。化学发光核酸检测生物素标记的RNA探针。11.细胞核和细胞质提取...
纳米抗体-酵母展示|纳米体|HSA|激动剂|酵母|纳米|抗体|-健康界
(C)流式细胞仪分析图显示了两种染色试剂:CD47生物素和α-HA抗体的长度依赖性。649个氨基酸的长柄被用于所有的纳米抗体展示实验。SupplementaryFigure3AnalysisofHSA-targetednanobodies.(A)LibrarydesignwasassessedbymonitoringthechangeinaminoacidfrequencyinCDR3throughoutselectionrounds...