WB 条带还能「找黄牛」,200 元一套,导师:你试下就可以退学了
加载缓冲液的成分:5%β巯基乙醇作用:有助于破坏蛋白质中的二硫键,进一步促进蛋白质的变性。通过这些步骤,可以确保蛋白质在凝胶电泳中的表现更加一致和准确,从而得到可靠的实验结果。电泳条件需谨慎遵循电泳条件对于WesternBlot实验的成功至关重要,因为它们直接影响蛋白质的分离效率和结果的清晰度,但是很多同...
Tris缓冲液中为什么要添加还原剂|乙醇|氧化|蛋白质|tris_网易订阅
在实验中,DTT的添加浓度通常为5~10mM,以确保还原剂浓度远远高于缓冲液中蛋白浓度,从而保护蛋白质免受氧化损伤。2、三(2-羧乙基)膦(TCEP)TCEP是一种硫醇类还原剂,在蛋白质化学及蛋白质组学研究中具有广泛应用。与DTT相比,TCEP不仅还原效率高,而且在某些巯基的交联反应中不需要祛除,使得实验过程更为简便。此外,...
消息:DL-二硫苏糖醇 ≥98% (HPLC), ≥99.0% (titration)
通常,使用DTT(100mM)所需的浓度是使用2-巯基乙醇(5%v/v,700mM)的浓度的七分之一。生化/生理作用二硫苏糖醇(DTT)广泛用于化学肽合成及硫醇蛋白的生化制备。此外,该物质还用于各类蛋白质化学研究,例如蛋白质折叠和酶活性。另外,它还可作为避免DNA修饰的酶稳定剂。DTT特异性介导硫醇-二硫...
蛋白质浓度测定常用的三种方法
根据样品的估测浓度确定各点的具体浓度。稀释BSA时可以用水或与样品一致的溶液。如待测样品的浓度约为200μg/mL,可按下表的次序加入BSA标准品、样品及BCA工作液。3.取适量体积的标准蛋白,以蛋白液:工作液=1:20的比例混匀。37℃温浴30min。冷却至室温。4.将样品与标准品在562nm...
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测蛋白大小、纯度及浓度
2、用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质相对分子量时,必须同时作标准曲线。不能利用这次的标准曲线作为下次用。3、有些蛋白质由亚基(如血红蛋白)或两条以上肽链(α-胰凝乳蛋白酶)组成的,它们在巯基乙醇和SDS的作用下解离成亚基或多条单肽链。因此,对于这一类蛋白质,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定的只是它们的...
生化实验室15大常识_资讯中心_仪器信息网
保存在冰箱中的酚,容易被空气氧化而变成粉红色,这样的酚容易降解DNA,一般不可以使用(www.e993.com)2024年10月22日。为了防止酚的氧化,可加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇。8-羟基喹啉是带有淡黄色的固体粉沫,不仅能抗氧化,并在一定程度上能抑制DNase的活性。2.如何将不同构型的质粒DNA区别开?
危险废物鉴别标准 毒性物质含量鉴别
3.14反应液将0.5g邻-苯二甲醛在1L容量瓶内溶于10ml甲醇中,再加900ml无有机物的试剂水,50ml硼酸盐缓冲液(pH10).经充分混匀后加入1ml2-巯基乙醇,再用无有机物的试剂水稀释至刻度,充分混合溶液.按需每周制备新鲜溶液,要避光冷藏.3.15标准液3.15.1库存标准液:将0.025g...
蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳原理、仪器试剂和操作步骤
1.配制分离胶浓度8%、体积15mlH2O6.9ml30%凝胶贮备液4.0ml1.5mol/LTris-HCl(pH8.8)3.8ml10%SDS0.15ml10%过硫酸胺0.15mlTEMED0.01ml2.一旦加入TEMED,混匀后立即小心地将分离胶注入准备好的玻璃板间隙中,为成层胶留有足够空间。用毛细管轻轻在其顶层加入几毫升正丁醇,以阻止空气中的氧气对...