...棘孢木霉天冬氨酸蛋白酶基因的克隆表达及其对大豆分离蛋白的水解

3重组毕赤酵母工程菌株的诱导表达和rAsp的纯化重组毕赤酵母工程菌株在三角瓶中诱导表达,当发酵至144h,发酵液酶活力达到最大,约为25.8U/mL,明显高于从棘孢木霉中克隆的天冬氨酸蛋白酶rAsp55(最高酶活力9.52U/mL)和rTaAsp(最高酶活力18.5U/mL),表明rAsp获得了高效表达,为该蛋白酶的应用研究提供了保障。

质粒及细胞系构建定制服务|病毒|克隆|shrna_网易订阅

质粒(Plasimid),它是一种独立于宿主染色体(拟核)之外的闭合环状双链DNA分子。它具有自主复制的能力,能够在子代细胞中保持恒定的拷贝数,还能够表达它所携带的遗传信息。此外,质粒载体通常携带抗性基因或报告基因,便于筛选和示踪。这一系列特征使得质粒在基因工程中具有较高的应用价值。质粒载体在基因表达调控中的作用如...

我科研人员开发新型实用分子克隆技术,系统表达载体开放共享

为了方便NC克隆技术的推广使用,言普等还构建了一系列配套的系统表达载体,包括原核表达、酵母双杂交、植物过表达、植物RNAi、植物亚细胞定位、植物BiFC、植物基因编辑、植物VIGS、哺乳动物表达载体等,初步形成了一个标准化的克隆系统,为基因功能研究提供了一个便利的技术平台。该套载体向科研人员开放共享,可免费索取使用。

immunoPET与核素偶联抗体药物系列 | 探针载体

为了获得高度特异性的肿瘤摄取和低背景保留,成像探针的载体通常是抗体、抗体片段、VHHs或多肽等分子。本期内容为大家介绍免疫PET成像中常用的探针载体。单克隆抗体mAbs(monoclonalantibodies)开发和使用在过去十几年取得相当大的成功,各种mAbs已经用于治疗实体瘤、恶性血液病以及非癌症疾病。放射性核素标记的mAbs也成功...

分子克隆技术全攻略

关于载体一般常用到的是质粒载体,它是一种小型环状DNA分子—在基因工程中作为最常用,最简单的载体。与天然质粒相比,质粒载体通常带有一个或一个以上的选择性标记基因(如抗生素抗性基因)和一个人工合成的含有多个限制性内切酶识别位点的多克隆位点序列,并去掉了大部分非必需序列,使分子量尽可能减少,以便于基因工程操作...

Nature争鸣| 裸鼹鼠抗癌能力之争:HRAS表达量可能是关键决定因素

英国团队使用同样的实验方法分别转染了原代裸鼹鼠细胞和小鼠皮肤细胞(www.e993.com)2024年11月29日。他们发现与美国团队发表的结果不同的是,从小鼠皮肤细胞中拿到的细胞没有出现明显的肿瘤克隆,可以解释美国团队使用多种瞬时表达载体而不使用抗生素筛选将SV40LT;HRASG12V组合导入原代细胞,这是一种非常低效的引入外源癌基因的方法。

中国热科院在分子克隆领域标准化研究方面取得新进展

NimbleCloning(NC克隆)是中国热科院生物所在前期研究中开发的新型分子克隆技术。在此基础上,本研究继续开发了一套基于NimbleCloning的植物表达载体(pNC载体系统),具有NimbleCloning的主要优点:1.操作简单。目标基因可以通过一步克隆反应直接连接到载体,避免了载体的酶切、回收过程。2.标准化。该套载体均具有NC克隆...

55%乳腺癌患者存在HER2低表达,JCO发表权威综述

双特异性抗体（BsAb）是针对两个不同表位的单克隆抗体，能够抑制多条致癌途径，迫使肿瘤和免疫细胞连接，和/或将有效载荷运送到肿瘤微环境中。几种抗HER2的BsAb正在开发中，尽管只有一小部分在HER2-LowBC中进行了测试。ZW25是一种针对HER2结构域2和4的bsAb，体内研究显示其在HER2-lowBC模型中具有抗肿瘤活性。...

猪伪狂犬病毒gB基因在大肠杆菌中的分段表达

将阳性质粒用EcoRI和SalI进行双酶切,回收gB各片段,连接至经同样双酶切的原核表达载体pGEX-6P-1中,构建原核重组表达质粒pGEX-6pgB-1、pGEX-6p-gB-3\pGEX-6p-gB-4和pGEX-6p-gB-5。转化至BL21感受态细胞。筛选阳性克隆,提取质粒,用EcoRI和SalI酶切鉴定,鉴定正确的阳性质粒送上海英骏生物技术有限公司测序。

综述| mRNA药物全面解读

伴随着全球的新冠大流行,新冠疫苗备受关注。目前市面上的新冠疫苗有三个类型:传统灭活疫苗、腺病毒载体疫苗以及信使RNA(mRNA)疫苗。传统的灭活疫苗我们比较了解,它是将经过处理、没有传染性和致病性的病原体注入人体,让免疫系统认识这种病原体,从而达到预防的目的。腺