【血管新生之钥】HUVEC细胞培养攻略

使用不含Ca2+和Mg2+的无菌PBS清洗细胞,加入3mL胰酶(0.05%trypsin-0.02%EDTA)于37℃培养箱孵育30-60s,轻柔吹打细胞使其脱落分散;注意:HUVEC细胞消化时,胰酶浓度不宜过高,一般推荐使用的胰酶浓度是0.05%。另外,该细胞对胰酶消化较为敏感,应避免消化过度。2.加入10mL完全培养基终止胰酶反应,将细胞悬液收集至15mL...

推荐:EMEM培养基@2024资料已更新

将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液,以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。1.2.2细胞传代原代培养的hek-293细胞48...

生物制药细胞培养实验室微生物污染解决办法

如果是霉菌污染,在以PBS润洗2~3遍后换液,无需加入高浓度双抗。培养48h后污染再次出现时,再另行加入即可。如果是真菌污染,在PBS润洗、换液后可加入两性霉素B(两性霉素B有细胞毒性,不推荐使用),也可加入300μg/mL氟康唑培养,污染控制后改用150μg/mL培养2~3代。如果怀疑是支原体污染,则可进行PCR检测或直接...

免疫卫士——T细胞培养攻略

c)PBMC接种于上述24孔板中,接种密度1*106/mL,培养体系为含10%热灭活胎牛血清、1%双抗、3μg/mLanti-humanCD28、100IU/mLhumanIL-2的RPMI-1640培养基;d)培养3天后,收集细胞,计数,台盼蓝染色检测细胞活力,用于进一步分析。??磁珠法以美天旎TCellTransAct??,huma为例:在100nm右旋糖苷...

实验干货 | 细胞冻存与复苏实验指南(不看后悔!!!)

5.试剂:D-Hanks液、小牛血清、培养液、双抗(青霉素、链霉素)、胰蛋白酶(0.08%)、1NHCl、7.4%NaHCO3、DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油。2细胞冻存1.配制冻存培养液:配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的冻存培养液。2.处理细胞:取对数生长期的细胞,使用胰蛋白酶将单层生长的细胞消化下来,对于...

奥浦迈2023年年度董事会经营评述

在CHO细胞培养基方面,除了丰富的定制化培养基产品,公司还完成了多款针对不同CHO细胞亚型的高性能的新补料培养基开发,包括OPM-AF183、OPM-AF169、OPM-AF69V3、OPM-AF72V2、OPM-AF132等,这些补料能够高效维持重组CHO细胞高密度、高活率及高蛋白表达的状态,其中OPM-AF169、OPM-AF72V2、OPM-AF132三款补料已被客户...

基于CHO细胞的抗体/蛋白药物研发生产用培养基解决方案

3、TobitecFA&FBPro应用于应用于PD-1联合双抗Background:CCM:CHO-1CDM08+TobitecFA&FBProVSTobitecFA&FBVSCommercialCellLine:CHO-K1(Lonza)Process:FedbatchPruduct:MonoclonalantibodyTobitec??拥有CHO细胞培养及蛋白/抗体表达完整系列商业化培养基产品,针对不同CHO细胞株及产...

细胞培养用液的配制具体步骤与消毒方法

可以配制200mmol/L谷氨酰胺液贮存,用时加入培养液。配制方法为,谷氨酰胺2.922g溶于三蒸水加至100ml即配成200mmol/L的溶液,充分搅拌溶解后,过滤除菌,分装小瓶,-20℃保存,使用时可向100ml培养液中加入1ml谷氨酰胺溶液。九.肝素溶液的配制:含有肝素的培养液可以使内皮细胞纯度提高,肝素加入全培养液中最终浓度...

生物药行业快速发展,设备耗材国产替代正当时

制剂灌装主要是将纯化获得的原液进行制剂化处理,经过配置-除菌过滤及灌装-冻干-轧盖-灯检-贴签与包装后,最终获得产品。整个生产过程连续,中间环节较少,生产过程中所使用的设备、耗材与小分子药物有很大的不同。2.生物制品生产工艺拆解2.1.上游发酵:从细胞株到大规模生物反应器生产的一系列细胞放大培养...

BOE IPC·2023 智慧医工论坛精彩演讲内容实录

大家可以看到主要针对的是极其特殊的人群,是针对24h内的中风的人群,一组给他用阿司匹林,另外一组给他用双联抗血小板,我想这种技术上的或者策略上的进步实际上是一个巨大的创新,有些人会认为这是一个非常简单的想法,不就是两个药比较吗,但是大家不知道后面有非常深的临床研究循证医学技术的进步。这个技术的进步...