HIV-1感染机制新发现!mBio:衣壳蛋白协助DNA整合

可以从感染细胞中提取具有逆转录活性和DNA整合活性的HIV-1复制复合体,如逆转录复合体(RTC)和前整合复合体(PIC)。举例来说,已经成功从急性感染细胞的细胞质和细胞核中提取出PIC。这些PIC在体外保持着将病毒DNA插入各种外源DNA底物(比如线性DNA、质粒DNA、结合核小体的DNA以及分离的染色质)的活性。因此,PIC的研究有...

重医谢国明教授:DNA检测新策略,探索癌症早筛密码

在证明了所提方法在质粒样本中检测KRASSNVs的正交性后,该研究进一步探讨其在实际临床检测的实用性。研究人员收集了45名接受结直肠癌手术的患者的结直肠癌组织标本,提取的基因组DNA(gDNA)。提取后的gDNA浓度约为100-400ng/μL,适合后续PCR。通过MU-PCR富集后,生成了有或没有酶切的活性双链产物。使用六种探针...

猫麻疹病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立

将重组质粒标准品10倍倍比稀释后(3x107拷贝/μL-30拷贝/μL)作为模板,经本研究建立的荧光定量RT-PCR扩增,结果显示该方法检测下限为30拷贝/μL(图4A),而常规RT-PCR的检测下限为3000拷贝/μL(图3B),荧光定量RT-PCR方法的敏感性为常规RT-PCR的100倍,表明本研究建立的方法敏感性较高...

关于乙肝疫苗:过去、现在,与未来

然而,宿主因素(包括年龄、多种慢性疾病、既往乙型肝炎病毒接触史及接种疫苗后的时间)以及与疫苗相关的因素(如疫苗类型、剂量与接种时机)均可能对疫苗效力产生影响。20世纪90年代,科研人员借助感染乙肝病毒的哺乳动物细胞,成功研发出第三代乙肝疫苗。这些细胞涵盖了中国仓鼠卵巢(CHO)细胞与表达并释放小S及中等前S2糖蛋白...

谷歌DeepMind再放大招!AlphaProteo直接设计全新结合蛋白,加速药物...

提纯蛋白质,确定浓度、pH值、缓冲液等条件,控制蛋白质稳定性等。1、目的蛋白质信息检索与调查-利用生物信息学工具搜集目标蛋白质的基因序列、结构域、同源蛋白质的信息-分析目标蛋白质的理化性质,如分子量、等电点、聚合程度、稳定性等2、质粒制备-设计引物,克隆目标基因到表达载体-转化表达宿主,提取...

益生菌不一定全是“益”,也存在一定的安全风险|特应性皮炎|微生物...

不同菌株可以产生非常特定的效果(www.e993.com)2024年11月6日。益生菌特异性取决于剂量、菌种、持续时间、给药途径和适应症等影响因素,还可能因施用对象健康或疾病状况、不同年龄、肠道微生物组成而异

干货| 酶切实验切开 or 切不开,真的是玄学吗?

??模板DNA上酶切位点的数量决定酶的用量,酶切位点数目多的模板切割效率低于酶切位点少的模板,针对酶切位点多的模板DNA,可以增加酶的用量。??基因组DNA使用的酶切体积一般高于PCR产物以及质粒DNA。4.限制性酶切位点??酶的识别位点过于接近终端(线性DNA)以及切割位点相邻(双酶切)都可能影响酶切效率。

沈阳三生制药取得质粒 DNA 制备用碱裂解设备专利,实现加液结束即...

专利摘要显示,本实用新型提供一种质粒DNA制备用碱裂解设备,包括固定架、转动底盘、反应罐、第一进液管路、第二进液管路以及进气管路,所述转动底盘设于所述固定架的底部,所述反应罐与所述转动底盘可拆卸连接,所述第一进液管路、所述第二进液管路与所述进气管路均固定于所述固定架的顶部,所述进气管路的出气...

...可以“交换”抗生素抗性基因?柳叶刀子刊:细菌质粒能够跨菌门传播

目前只有少数案例报告了从革兰氏阴性细菌向革兰氏阳性细菌的DNA转移,这些案例涉及穿梭载体或已知的广泛宿主质粒(如IncP),但这些研究从未使用与临床相关的质粒、未评估质粒的稳定性,更未研究质粒DNA向革兰氏阴性菌的转移作为反向革兰氏转移的证据。近期,柳叶刀子刊发表了一项在中国福建省福州地区进行的医院污水微生物调查...

质粒DNA提取及浓度纯度测定

同时经过NaOH和阴离子去污剂SDS处理使细胞膜崩解,从而达到菌体充分的裂解,同时细菌染色体DNA缠绕附着在细胞膜碎片上,离心时易被沉淀出来,而质粒DNA则留在上清液内,其中还含有可溶性蛋白、核糖核蛋白和少量染色体DNA,实验中加入蛋白质水解酶和核酸酶可以使它们分解,通过碱性酚(pH8.0)和氯仿—异戊醇混合液的抽提可以去除...