这能说吗?00 后师妹刚来就敢给师兄师姐「培训」构质粒
结果出来后发现,师妹的结果没问题,我的却莫名出现了非特异性扩增问题。在质粒提取时担心质粒提取量不足,加大了菌液的使用量。按比例分了几份,取了适当的量之后就开始做提取了。师妹没想到过多的菌液会导致裂解不彻底、杂质变多,后续的纯化步骤变得困难,质粒的纯度和得率反而下降。全程目睹这一切的导师直...
pCMV-N-Flag-BioID2 (邻近蛋白生物素标记质粒)
这种技术的主要步骤包括:构建质粒:将生物素标记序列克隆进质粒中,通常使用特定的克隆技术(如PCR扩增和限制性内切酶切割)。表达和标记:转化表达宿主细胞,如大肠杆菌(E.coli),进行蛋白表达,并利用生物素标记的标记剂标记邻近蛋白。应用:用于分析蛋白质与其他生物分子(如蛋白质、RNA或DNA)之间的相互作用,例如通过近...
CRISPR文库质粒低至??999,300种Cell Pool一步即筛
低至¥999CRISPR-iScreen??文库质粒低至¥8888CRISPR-iScreen??文库CellPoolCRISPR-iScreen??文库一站式服务源井生物可提供从文库质粒构建到病毒包装、细胞转染、药物筛选、NGS测序和生信分析等一站式文库定制服务,多种交付方式满足不同科研需求。等等,还没结束基因筛选出来后想用细胞模型来验证!选择...
干货| 无内毒,细胞更健康:揭秘质粒纯净抽提新魔法
特殊吸附柱和精心研制的缓冲溶液,通过选择性吸附的方式与质粒结合,再配合专用的漂洗液,形成多重保障机制,大幅提高了内毒素的去除效率。除了科技我们还有“狠活”,这一系列产品的设计充分考虑实际操作体验,将内毒素去除步骤与上柱结合步骤二合一,只需一轮过柱,即可完成上柱。同时,我们优化了裂解液配方,添加颜色指示剂,...
干货| 纯净无内毒,打赢细胞保卫战:揭秘质粒无内毒抽提的科学魔法
4)其他影响:内毒素还可能影响PCR扩增、酶活性测定、细胞培养等实验结果的可靠性和准确性。Vazyme最新推出整套无内毒素质粒提取系列产品,在传统内毒素去除技术的基础上,进行了创新与优化。特殊吸附柱和精心研制的缓冲溶液,通过选择性吸附的方式与质粒结合,再配合专用的漂洗液,形成多重保障机制,大幅提高了内毒素的去除效...
国产PCR核酸扩增仪10月热度榜(上),小编精心梳理
2倍浓度差异样品的区分:质粒DNA以2倍梯度进行稀释后扩增,每个梯度进行7个重复(www.e993.com)2024年10月23日。结果显示出优秀的分辨率,灵敏度,重复性和数据的均一性。(CV<0.5%),R2=0.998。??11个数量级的动力学范围盘古快速荧光定量PCR系统线性范围检测。质粒DNA以10倍梯度稀释,共11个浓度梯度,使用HEX探针检测,R2=0.998。结果显示盘古具有...
CRISPR文库质粒低至999元,300种Cell Pool想筛就筛
品质保证:高效感受态:确保质粒扩增质量,覆盖度高,均一性好;独特CellPool制备工艺:保障高效生产、细胞覆盖度高。优质高效:近100种Cas9稳转株,细胞代次低、活性高、状态好,轻松加快CRISPR文库构建。服务周到:提供专业技术支持和售后服务。近期KO细胞福利来啦!
mRNA药物制备的关键技术——切向流过滤的高效应用
1、mRNA生产工艺步骤mRNA的生产工艺步骤基本上分为以上三个步骤,质粒DNA原液制备的基础是转录模板的序列设计,制备方法通常采用质粒DNA扩增,也可采用PCR扩增。以DNA扩增为例,通常采用工程菌E.coli发酵来扩增。先进行菌种复苏,质粒DNA的生产经过发酵培养、收获澄清、精制纯化、线性化、分装储存等步骤。mRNA原液制备主要工...
国自然撰写:经典分子机制研究(一)|位点|质粒|扩增|dna|rna|聚合酶...
用构建好的pGL3-Basic-基因BP(-1761/+37)为模板扩增不同长度的片段,按上述的步骤连入pGL3-Basic质粒,测序鉴定正确,-80℃保存。2.1.5双荧光素酶报告系统确定基因B启动子区核心区域我们将成功构建的基因B启动子区的荧光素酶报告基因质粒共同转染HEK-293细胞,并同时转入pRL-TK载体作为内对照...
mRNA疫苗超全知识汇总,看这一篇就够了!
第一步:DNA质粒制备原液制备开始于质粒构建。通常使用的DNA质粒为环状质粒,质粒上含有设计好的序列模块,其中包括刺突蛋白编码。利用电流打破细胞膜,并将环状DNA质粒引入大肠杆菌。此后,大肠杆菌被储藏于含有大量营养物质的溶液中进行繁殖扩增。大肠杆菌每20分钟分裂一次,4天内可以得到数万亿DNA质粒。提取并纯化DNA质粒,...