用多聚甲醛固定细胞爬片、甩片或切片
第三种方法是根据固定方法来制备抗体,先将抗原用固定液固定后,再去免疫动物产生抗体。在这种情况下,所用抗原将和实验中固定后的抗原非常相似,能够获得结合固定抗原的抗体。
不均匀、易脱片…...如何不用爬片直接做免疫荧光?
准备细胞悬液(5x104细胞/mL),并在??-Slide8孔载玻片每个孔中加入300??L盖上盖子。将载玻片放入培养箱(37°C;5%CO2)中,让细胞附着。培养至少3小时或过夜。Tip:对于更长的细胞培养,建议几天后进行对细胞进行换液。2固定,渗透和封闭使用细胞培养抽吸装置从孔中吸出细胞培养基,将...
细胞凋亡重视这 3 步,拿到让 CNS 难以拒绝的梦中情图
TUNEL适用于细胞爬片、涂片以及各种切片,样本兼容范围广泛,不过周期相对较长,影响因素较多,我们通过优化核心操作步骤:固定、通透、标记这3步,就能拿到CNS都难拒绝的漂亮实验结果(文末含惊喜彩蛋~)。3步搞定细胞凋亡实验!Step-1荧光星星点点?多半是固定液有问题原因分析:不恰当的固定会让细胞、组织自溶...
...需任何标记鉴别生物样品,病毒、单细胞、活细胞观测统统不在话下!
图4.o-ptir观测固定未染色miapaca-2细胞成像。(a)固定的未染色的miapaca-2细胞的光学图像;(b)红色方块区域的放大图像;(c)opo波束段的o-ptir红外光谱;(d)qcl波束段o-ptir的红外光谱;(e)黑色区域的拉曼和红外光谱参考文献d.[mammaliancancercell]“analysisoffixedandlivesinglecellsus...
学会这 6 步,教你轻松获得完美的免疫细胞荧光图
做免疫荧光第一步就是先准备细胞爬片。很多童鞋发现实验做完,显微镜下一看,细胞也所剩无几了。这里需要注意,细胞不能太多,连成一片那种细胞很容易在PBS漂洗步骤大片脱落。其次细胞也不能太少,这样细胞也会被洗掉,拍照效果不理想。正常的细胞密度最好在60-70%左右即可,在显微镜下可以看到细胞一个一个的形态...
小鼠原代海马神经元细胞的分离培养方法!
3.1.实验步骤(1)细胞爬片取3片玻璃片于24孔板中,每孔加入培养基1mL,加入细胞0.02million个/孔(www.e993.com)2024年9月19日。置培养箱2h或过夜。(2)固定细胞爬片后,吸出培养基,用PBS洗1遍,加入4%PFA于4℃固定30min。用PBS洗3×5min/次。也可最后一次不吸出PBS,放4℃过夜。
...解郁方调控经典Wnt信号改善糖尿病并发抑郁症海马神经干细胞...
各组细胞建模及药物干预,24h后取出细胞爬片。采用免疫荧光方法对神经干细胞中的Brdu进行显色,吸去培养基,用PBS漂洗细胞3次,每次5min,所有加液及吸液均应轻柔缓慢进行以减少细胞脱片。每张爬片上依次加入足量4%多聚甲醛室温避光固定30min后吸去,PBS洗涤;加入足量0.3%Triton-100...