指南共识丨纳米孔测序在病原微生物检测中的应用专家共识

(1)样本应根据实际送检情况选择合适的运输方式:若样本可在24h内送达实验室并开始检测,可考虑用冰袋低温运输;若运输时间在24～72h内,应使用干冰运输,送达实验室后应立即进行样本前处理和核酸提取,以防止核酸降解影响检测效果。运输过程中应尽量避免剧烈颠簸,以规避漏液导致的污染风险。若怀疑高致病性或新发突发传...

鹦鹉博尔纳病毒的鉴定与M基因遗传进化分析

灰鹦鹉腺胃与肌胃均一份,由广州某异宠动物医院提供,进行RNA抽提,反转录为cDNA,保存与﹣20℃备用。2实验方法2.1影像学检查需要拍摄正侧位X线影像各1张。2.2组织病理学检查对病死鹦鹉进行系统尸体剖检,观察和记录大体病变;通过大体病变观察结合临床症状表现,初步怀疑存在可能PaBV感染。剖检过程中着重取病变...

重磅!为让国内神经科学领域大步向前,多位国内知名学者联合举办...

(1)各种组织、血液和体液等样本的提取流程与注意事项;(2)代谢物抽提流程与注意事项;(3)样本及代谢物的运输与保存问题;B2LC-MS数据质控与搜库(1)LC-MS实验过程中QC和Blank样本的设置方法;(2)LC-MS上机过程的数据质控监测和分析;(3)代谢组学上游分析原理——基于CompoundDiscove...

总RNA提取实验原理、步骤和问题解答

8.RNA沉淀将在离心底的侧面形成。小心吸弃上清液,注意避免吸弃RNA沉淀。四、RNA清洗9.离心管加入1ml预冷的75%乙醇(1mlTrizol至少1ml乙醇清洗DNA),振荡混均30秒,使沉淀振荡起来,室温12000rpm×1～2分钟。(有文献称不超过7500g离心)。尽可能吸弃上清液,防止RNA沉淀丢失。重复以上清洗步骤一次。在75%乙醇中...

干货| 在实验室里怎么骚操作才能得到完整纯净的 RNA?

我自己在做实验的过程中,会拆一盒新的一次性塑料手套,每做一步换一双手套;口罩戴三层。整个步骤全部在超净工作台中进行,就算求个心理安慰/手动狗头。笔者的丑照(逃)现在来看这个超净台的玻璃开得有点大了……3.保存方法。如果试剂盒提供的RNA-freeWater溶解RNA,溶液要在-80℃冰箱里低温...

实验室常见有毒试剂有哪些?注意事项及应采取防护措施

1-3RNA提取及PCR等实验:苯、二甲苯、酚、trizol、氯仿等有机溶剂可致癌,DEPC(焦炭酸二乙酯)用于溶解RNA,潜在的蛋白质变质剂(www.e993.com)2024年11月15日。1-4蛋白电泳:PMSF用于蛋白提取,高强度毒性;SDS(十二烷基硫酸钠)用于SDS-PAGE电泳凝胶配置,有刺激作用,可引起呼吸系统过敏性反应;丙烯酰胺(未聚合)蛋白电泳凝胶原料,潜在神经毒性;TEMED(...

破防!清纯小师妹深夜给师兄发信息竟遭拒:求你了!这20个实验...

1.划痕愈合实验2.TRIzoI抽提细胞RNA3.反转录反转录是在反转录酶的作用下以RNA为模板合成DNA的过程,合成的DNA链称为与RNA互补DNA(complementaryDNA,cDNA)。4.qPCR检测实验更多实验步骤长按二维码免费领书查看三、标书、论文实验必备,一书多用!

推荐| 真核生物RNA聚合酶发现50周年——转录调控研究简史

在此之后,很多实验室开始寻找转录起始所必须的DNA序列,而Roeder实验室则认为细胞抽提物中能够起始转录的未知蛋白因子更为重要。于是他们回到了冷库中,不断地优化蛋白质纯化的方法,解析HeLa细胞核抽提物的多个组分。1980年,Roeder实验室纯化并鉴定出RNA聚合酶III起始转录所必须的TFIIIC、TFIIIB。类似的方法迅速被同行效仿,...

美国科幻大片里的生物实验室现实里是怎么样的?

1、由于RNA的分子结构特点,RNA极易降解,液氮可以使样本组织瞬间达到低温状态,抑制组织内源性RNase降解RNA;2、由于液氮极低的温度可以使样本组织和细胞都变得很脆(对,就是嘎嘣脆的那种~),通过研磨便于细胞的破碎,释放出细胞内部的核酸;3、组织的匀浆过程是RNA提取是否成功的关键步骤之一,液氮研磨可以保持组织...

高通量测序之RNA提取那点事~~

2.氯仿在RNA抽提过程中的作用苯酚对蛋白质的变性作用远大于氯仿,但是酚的比重略比水重,碰到高浓度的盐溶液,离心后酚相会跑到上层,不利于含RNA的水相的回收;但加入氯仿后可以增加比重,使得酚/氯仿始终在下层,方便水相的回收;另外酚与水有很大的互溶性,如果单独用酚抽提,抽提后仍有大量的酚溶解到水相中,其会抑...