Nat Genet | 基于WGS数据绘制癌症进展过程中ecDNA扩增图谱,揭示...

在第一个时间点(T1)检测到343个扩增子,其中55个为ecDNA;在T2检测到258个扩增子,其中61个为ecDNA。为确定扩增子随时间而保持稳定的频率,研究团队以成对的方式确定了扩增子的相似性,并基于共享的断点和基因组内容,计算了两个具有重叠区域的扩增子之间的相似度指标。结果显示,T1中54.5%ecDNA扩增子和16%ChrAmp...

体内实验级重组抗小鼠PD-L1大鼠IgG2b Kappa单克隆抗体-Syd Labs

免疫源:用小鼠PD-L1cDNA和小鼠PD-L1CHO转染物免疫大鼠产生原大鼠杂交瘤(克隆名称:10F.9G2)。抗体形式:0.2μM过滤溶液,1xPBS内毒素:根据LAL方法,≤1EU每1mg蛋白质。提供特级体内实验级重组抗小鼠PD-L1大鼠IgG2bKappa单克隆抗体(克隆号:10F.9G2.1)(InVivoGradeRecombinantAnti-mousePD-...

一步法荧光定量试剂盒的选择标准

1、操作简单加样环节少,两步反应都在一个管中完成,这种方法能克隆微量mRNA而不需构建cDNA文库,省略了cDNA与qPCR反应之间体系转换的过程,操作方便快捷,也大大提高了实验的效率,非常适用于高通量扩增/筛选;2、减少污染cDNA合成和扩增之间不需要打开反应管盖,更少的移液步骤能够减少污染的风险,同时具有更少...

治疗癌症的TCR-T细胞:方法、数据和挑战

发现CTL克隆(1G4)以HLA-A*02:01限制的方式识别对应于NY-ESO-1的氨基酸157-165的SLLMWITQC肽。请注意,SLLMWITQC肽序列与LAGE-1抗原衍生和表达的序列相同,因此LAGE-1抗原阳性肿瘤也被1G4T细胞克隆靶向。将α和β链TCR蛋白的成熟细胞外区域的cDNA编码序列克隆到单独的大肠杆菌质粒载体中并表达为蛋白质包涵体。

植物抗病基因克隆的方法和技术研究进展

序列克隆即已知所克隆基因序列或同源基因的序列时采用的方法。这种情况下,可以从DNA序列数据库(如GenBank数据库)中查找有关基因的序列,然后可以设计并合成一对寡核苷酸引物,提取所要分离基因的植物染色体DNA或者用RNA在逆转录酶的作用下合成cDNA的第一条链,以此为模板,采取PCR或RT-PCR的方法来克隆基因。

人类基因全长cDNA克隆获重大进展

人类基因全长cDNA克隆获重大进展近日,国际学术杂志《生物科学公共图书馆杂志》在其网站上发表了“人类21037基因全长cDNA整合注释”一文,含有这些基因重要信息的数据库正式向公众免费开放(www.e993.com)2024年11月28日。该工作是全面认识人类基因组功能的第一步,是继人类基因组测序后的又一重大成就,成为全球科学界和全人类的共同财富。

分子克隆技术全攻略

整个分子克隆从设计引物开始,根据需要拿到的目的蛋白相应地核酸序列,设计出含有酶切位点及所需Tag的特异性引物分子。剩下就是获得目的基因、酶切、连接、转化和筛选、菌液PCR或酶切鉴定及测序比对。主要的实验流程如下图所示,不同的克隆方法(我们下期继续介绍)在酶切和连接的步骤会有所不同,不同整体的流程基本一致...

顶刊综述丨NAT REV MICROBIOL (IF:78): 对甲病毒入侵和抗体保护的...

NRAMP2、VLDLR和ApoER2与SINV、SFV和EEEV的E2-E1蛋白结合方式是否与MXRA8和LDLRAD3与其他甲型病毒的结合方式相似,还需要进行结构研究。了解甲病毒与宿主受体之间相互作用的分子和结构基础有助于鉴定防止甲病毒入侵、感染和发病的单克隆抗体、受体诱饵或小分子抑制剂。

2023国自然进入倒计时阶段!今年研究热点的“黑马”来了,这篇7分...

二、研究方法1.细胞:大鼠心肌细胞系H9C22.表达载体和转染:将大鼠Sfrp2的cDNA进行PCR扩增并克隆到LV-003慢病毒载体中,使用脂质胺??3000试剂进行转染。将慢病毒载体和包装载体共转染到293T细胞中,生产重组慢病毒。将H9C2细胞暴露于重组慢病毒并在含有2μg/mL嘌呤霉素的培养基中培养以产生H9C2-SFRP2和表达H9...

【重磅综述】单细胞分辨率下的免疫衰老

随后的步骤包括细胞裂解、mRNA逆转录合成第一链cDNA、第二链合成和PCR扩增cDNA、生成scRNA-seq文库。一些scRNA-seq方法在转录本上产生全长覆盖(如Smart-Seq2),而其他方法将测序覆盖范围限制在mRNA的3或5个区域(如10XGenomics平台)。最主流的scRNA-seq建库方法也有着一定的局限性,即只能捕获带有poly(A)尾的...