植物乳杆菌内源性质粒序列分析及其表达载体的构建

以克隆载体pUC19为模板,用引物pUC19-F/R扩增pUC19质粒上的大肠杆菌复制子Ori的DNA片段。以pSCPSP质粒为模板,用引物CmR-F/R扩增pSCPSP质粒上的氯霉素抗性基因CmR片段。用SOE-PCR将Ori片段与CmR片段连接构成OCR片段,利用PshAI、NheI两个限制性内切酶将OCR片段融合在pLP3质粒载体上,将重组质粒转化至大肠杆菌DH5α感受态...

每碱基0.2元起!交付质粒!呈源定制基因库开启基因合成新范式

但其最终交付形式与传统的基因合成相同,即经大肠杆菌菌落挑选后的、序列验证过的质粒,确保了产品质量。呈源生物提供多种质粒载体选择,包括pUC19、pET和pcDNA等标准载体,同时也支持客户提供的载体。插入基因的长度范围为450bp到2.5kb,可以满足绝大部分科研项目的需求。此外,如果基因库中的基因为抗体基因,呈源生物...

质粒DNA的提取纯化、限制性酶切及电泳检测

与天然质粒相比,质粒载体通常带有一个或一个以上的选择性标记基因(如抗生素抗性基因)和一个人工合成的含有多个限制性内切酶识别位点的多克隆位点序列,并去掉了大部分非必需序列,使分子量尽可能减少,以便于基因工程操作。通常所用的质粒载体有pBR322、pUC18、pUC19等,本实验提取pUC19质粒。从细菌中分离质粒DNA的方法都...

前纳豆激酶原基因化学诱导型表达载体的构建及鉴定

摘要:目的克隆前纳豆激酶原基因,实现其在大肠杆菌中的表达,并对其表达条件进行研究。方法从枯草芽孢杆菌中分离纯化基因组DNA作为模板,通过PCR扩增前纳豆激酶原基因,将其克隆到质粒pUC19中,构建重组克隆质粒pNK并转化大肠杆菌DH5α;将目的基因片段与表达载体pET30a连接,构建重组表达质粒pENK,转化大肠杆菌BL21(DE3),对其...