Nature 子刊都在做的膜蛋白研究,1 小时教你稳抓热点
去垢剂大概分为非离子型、离子型和兼性离子型,非离子型以TritonX-100和DDM为代表,一般比较温和,不易导致蛋白质变性;离子型以SDS为代表,对于膜蛋白溶解非常有效;兼性离子型结合了离子型和非离子型去垢剂的优点,以CHAPS为代表,通常用于膜蛋白结晶。内容策划:邹礼平内容审核:周育红题图来源:图虫创...
退退退!纯化实验八大常见问题,一文全给整明白了!
●目的蛋白与填料发生非特异性疏水或其他相互作用:在洗脱缓冲液中加入非离子型去垢剂(如2%TritonX-100)或提高NaCl浓度。●目的蛋白在填料中发生了沉淀:减少上样量;使用咪唑线性梯度而不是步级洗脱以降低洗脱得到的蛋白浓度;使用去垢剂或改变NaCl浓度;在变性条件(4~8M尿素或4~6M盐酸胍)下...
一站式缓解你的「开学综合征」|细胞|蛋白|膜蛋白|层析|垢剂_网易...
分辨率高、流速快、处理量大的CaptoHiRes系列离子交换层析柱,是很多小伙伴心中的onepick!为了保证良好的分离效果,请注意离子交换实验中的buffer环境:阴离子交换实验中不要添加阴离子型去垢剂,阳离子交换实验中则不能加入阳离子型去垢剂,以免影响层析柱载量。如果需要快速置换缓冲液环境,可以选择HiTrapDesa...
目标蛋白(target proteins)粗提方法
A.中性去垢剂又称非离子表面活性剂,对蛋白质的变性作用影响较少,宜于蛋白质或酶提取之用。一般市售中性去垢剂有聚乙二醇类,如PEG200;多元醇类表面活性剂,如山梨醇、司盘类和吐温类;聚氧乙烯脂肪醇醚,如苄泽类、平平加类;聚氧乙烯烷基苯酚醚,如IgepalCO、乳化剂OP、Triton、Pluronic(用作消泡剂、润湿剂、增溶剂...
氧化应激通过调节3CL蛋白酶的活性影响新型冠状病毒的复制
进一步生化实验分析发现氧化应激可以引发细胞内3CL蛋白酶的聚集,该聚集程度与蛋白活性呈正相关,且该表现为在TRITON-X-100等非离子型去垢剂裂解溶液中不可溶。通过突变分析发现,位于3CL蛋白酶外周的Cys85残基以及其形成的二硫键在3CL蛋白酶聚集体的形成过程中发挥了关键作用5。研究还发现,3CL蛋白酶可以通过促进...