使用祖先序列重建设计高功能热稳定蛋白

从该分析中选择的祖先II类KARI通过差示扫描荧光法测得的熔解温度(Tm)为59??°C,而大肠杆菌和水稻中现存的II类KARI的熔解温度分别为42–44??°C(图5b)。此外,该酶对2-乙酰乳酸的转换数(kcat)和比活性比大肠杆菌中的现有形式高8倍,尽管其米氏常数(Km)比大肠杆菌中的形式高5倍(图5c)。在不同温度下孵育1...

JACS:化学和生物“接力”催化,合成麦考环素氟代物

图3.高通量筛选方法的构建、定向进化与筛选随后经历MtCYP121的三轮定向进化迭代后,发现最优二突变体Q385A/A167M,其催化得分子内芳基氧化偶联反应转化率提升至86%(图3c)。经酶动力学参数测定,二突变体的转化数(kcat)为468.3s-1,米氏常数(km)为1.344mM,而野生型的转化数(kcat)为233.8s-1,...

丙二醛(MDA)测定的意义

有文献报道:采用不同浓度MDA体外干预大鼠肝线粒体,氧电极法检测线粒体呼吸控制率(RCR)、磷氧比(P/O),测定呼吸链复合物及α-酮戊二酸脱氢酶、丙酮酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶活性。结果:线粒体经MDA作用后,以苹果酸/谷氨酸或琥珀酸作底物,线粒体两条呼吸途径对MDA呈现不同的耐受力,前者在MDA100μmol/L...

湖大谭蔚泓院士团队:聚吡咯复合凝胶,现场手机比色法检测胆固醇

同时,使用建议的方法检测到的胆固醇含量与使用ELISA试剂盒检测到的胆固醇含量一致,这表明在实际应用中它可能是可行的(表S2)。使用相同的方法,其他三个血清样品中的胆固醇浓度分别为3.08、5.30和4.86mM。表2.人血清中的总胆固醇检测此外,通过使用琼脂糖水凝胶构建了一种简单的便携式测定试剂盒,以开发一种简便的方...

杨倩┃米根霉α-淀粉酶保守区域组氨酸突变及功能性质

米氏常数测定:分别以4、10、15、20和40mmol/L麦芽三糖为底物在标准酶活力测定条件下反应,以生成的麦芽糖为目标产物采用Lineweaver-Burk双倒数法计算酶对麦芽三糖的米氏常数;采用相同方法,分别以0.2、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0和6.0g/L可溶性淀粉为底物,以还原糖(以麦芽糖计)为目标产物计算酶对可溶性淀粉的...

2022年卫生资格考试前,检验人必懂的100个基本概念!

利用某些物质被紫外光照射后所发生的能反映出该物质特性的荧光,可以进行定性或定量分析的方法(www.e993.com)2024年11月16日。55.标准溶液亦称基准溶液,是浓度已经准确测知的溶液。56.米氏常数简指反应速度v为最大速度V的一半时所需的底物浓度。57.同工酶在同一种属中其理化及生物性质不同而能催化相同反应的酶。