CRISPR干预的CHO细胞系开发方法

除此之外,某些额外的设计技术,如同源介导的末端连接(HMEJ)(图2c)和Tild,将传统的基于HDR的供体从长HAs线性化,结合了NHEJ的高效率与HDR途径的高精度。4.1.体外线性化通过聚合酶链反应(PCR)方法使用同源臂特异性引物或限制性酶对传统的长同源臂供体进行体外线性化,构建一个不包含任何非同源序列的供体,可以显著提...

智能检测:松材线虫病快速检测仪的工作原理与应用

引物设计:利用针对松材线虫特征基因的专用引物和探针,在PCR反应中进行扩增。这些引物与松材线虫的DNA序列高度匹配,使得检测能够识别出线虫的存在。荧光标记:实时PCR仪器利用荧光染料或探针标记扩增产物,在每个PCR循环中实时监测荧光信号的变化,以此判断目标DNA的数量和存在。1.2工作流程样品准备:采集土壤或木材样本,...

谷歌DeepMind再放大招!AlphaProteo直接设计全新结合蛋白,加速药物...

-设计引物,克隆目标基因到表达载体-转化表达宿主,提取重组质粒-质粒测序等验证目标基因插入3、蛋白质纯化-选择合适的诱导表达等条件,表达可溶性或不溶性重组蛋白-裂解菌体,释放重组蛋白质-蛋白质纯化:亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤等层析技术的原理和实践等4、蛋白质不表达和包涵体问题-分析...

Nature重磅综述 |关于RNA-seq,你想知道的都在这

short-read测序是检测和定量转录组范围基因表达的最常见方式,部分原因是因为它比表达芯片更便宜、更易于应用,但更主要的是它可以获得全转录组水平高质量的表达数据。采用Illumina的short-read测序做DGE分析的核心步骤包括RNA提取,cDNA合成,接头连接,PCR扩增,测序和数据分析(图一)。由于mRNA片段化和基于beads的文库纯化过...

本期荐读丨优秀教学设计:基于工程思维培养的“基因工程”单元教学...

1)通过分析基因工程的基本原理和构建利用基因工程大量生产人干扰素的操作程序,阐释基因工程基于生物界的统一性,赋予生物新的遗传特性(生命观念)。2)通过小组合作对不同材料的DNA进行提取和鉴定、DNA片段的扩增及电泳,学会设计有针对性、可行的实验方案,并运用科学术语阐明实验结果(科学探究)。

2025天津医科大学《810生物学基础》全国硕士研究生入学统一考试大纲

三、细胞有丝分裂(M期)增殖的过程四、细胞增殖调控的基本原理五、细胞呼吸(一)糖酵解(二)有氧氧化(三)生物氧化六、光合作用(一)光反应(二)碳反应七、生物的遗传与变异减数分裂1、减数分裂的过程2、减数分裂和有丝分裂的不同3、减数分裂的意义...

「PCR 革新2.0版本」Adv Mater | 新的核酸扩增方法能够更准确地...

Draz说,“我们开发出一种新的DNA扩增方法,它不需要笨重的实验室设备,只需一个步骤就可以在不同的环境中进行。更重要的是,我们的方法不会像PCR方法那样削弱酶的作用。”AMPLON的多臂DNA引物设计可以化酶的缺点为优点,提高扩增效率并产生一致的结果。Draz说,“我们能够提高扩增效率,并将扩增时间缩短50...

基因检测在疾病确诊、家系遗传模式分析与再生育计划中的重要作用

这种方法最早由英国科学家FredSanger于1977年开发，使用链终止技术对DNA进行测序。桑格测序的原理可以概括如下：DNA分解成单链以引物为模板，通过DNA聚合酶合成新的互补核苷酸，形成互补链该链继续延伸，直到双脱氧核苷酸（链终止核苷酸）添加到链上，形成片段双脱氧核苷酸根据其携带的核苷酸（腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶和...

超多重 qPCR 新突破,阅尔基因创新技术在 Nucleic Acids Research...

其核心原理是:为每个靶标设计多个扩增子,在不同荧光通道的扩增曲线之间引入可编程的Ct值延迟,进而根据荧光出现顺序识别不同靶标(图1)。比如2个荧光通道(G和R)最多可以鉴别4个靶标。荧光通道数(F)和可控Ct延迟数(T)决定了CCMA的多重性:可控的Ct延迟是CCMA工作的基础,这一特性是通过抑制探针置换扩增(BDA...

东北农业大学张微副研究员等:CRISPR/Cas-等温扩增技术

RCA是一种高效的恒温核酸扩增方法,其原理为核苷酸链退火到环状DNA模板上,随后引物在DNA聚合酶的作用下沿着5′至3′的方向通过环状模板的循环扩展而延长。RCA与其他技术相比具有独特的优势,通过设计圆形模板序列,在适配体、DNA酶等的作用下定制所需要的RCA产物,极大拓宽了其应用范围。同时RCA技术凭借自身出色的效率、高...