基因工厂云探秘系列4-- 从PCR到基因组装:揭示合成关键步骤与精准...

常用的组装方法包括全片段酶促连接法和酶促填充法。全片段酶促连接法利用DNA连接酶将具有5'磷酸化且重叠互补的寡核苷酸片段连接形成双链DNA。酶促填充法基于聚合酶循环组装(PolymeraseCyclingAssembly,PCA)技术,使用DNA聚合酶将重叠的寡核苷酸延伸成双链片段,通过overlapPCR获取较长片段,然后将各片段一起组装至载体...

Nature Genetics | 操纵克隆配子体,成功创制四倍体番茄!多倍体...

为避开有性生殖中减数分裂重组过程,该研究首先对减数分裂DNA双链断裂形成(前期重组)、减数第一次分裂中姐妹染色单体的共分离以及减数第二次分裂这三个关键事件进行调控,以便创制出MiMe三突材料,进而获得二倍体的克隆配子体(固定母本遗传物质)。为了快速获得相关突变体的表型,该研究使用了生长周期短、转化效率高的特殊...

中国科学家首次克隆恒河猴活到成年!新技术可用人类辅助生殖

SCNT可以将一个成年非生殖细胞的DNA从预期的克隆体转移到一个来自已去除DNA的供体的卵细胞中。1996年，这项技术成功地从一个成年细胞中克隆出了第一个哺乳动物——多莉羊。从那以后，老鼠、兔子和狗等其他物种也被克隆出来，但克隆灵长类动物面临着更大的挑战。2018年，中国科学家成功克隆了食蟹猴，这是第一批使...

HER2 变异形式有哪些?不同瘤种分别推荐何种检测方式?又如何判读?

实际上,HER2为人类表皮生长因子受体2(Humanepidermalgrowthfactorreceptor2),是一种由ERBB2基因编码的酪氨酸激酶受体膜糖蛋白,由胞外配体结构域(ECD)、跨膜结构域(TM)和胞内酪氨酸激酶结构域(TKD)三部分组成,属于表皮生长因子受体(EGFR)家族中的一员[2,3]。HER2基因位于人类17号染色体长臂(17...

2024年9月Science期刊精华

在造血过程中,巨噬细胞确保正常造血干细胞的质量,并决定参与成体造血的造血克隆的数量。然后,巨噬细胞要么完全吞噬干细胞(称为“吞噬”),要么捕获干细胞的部分细胞物质(称为“梳理”)。梳理后的干细胞继续分裂,而注定死亡的HSPC克隆则被清除。过去的研究表明,HSPC与巨噬细胞的相互作用是由HSPC表面的“吃我”...

Cancer Cell:顾伟/刘彦卿等2万字长文综述全面总结p53领域研究进展

p53通过由两个十聚体重复组成的特定反应元件(RE)被招募到DNA:RRRCWWGYYY(R,嘌呤;W、A或T;和Y,嘧啶)(www.e993.com)2024年11月19日。p53直接调控300多个靶基因的转录。而考虑到间接调节的基因,p53可以调节数千个基因的表达。目前大多数被报道的p53靶基因是蛋白质编码基因,但p53还调节各种非编码RNA,比如miRNA、lncRNA,甚至circRNA。

Cell | 癌症转移综述

转移可分为三个阶段,它们可以在时间上重叠——传播、休眠和定植——在此期间,癌细胞经历一系列的步骤来入侵组织,在运输过程中存活,并在器官上定植,统称为转移级联。在传播过程中,携带致癌驱动突变的肿瘤细胞通过基底膜侵入更深的组织层,在没有生态位特异性生长因子的情况下获得生存能力。随后是近端血管或淋巴管,最...

《食品科学》:四川农业大学刘书亮教授等:丝状真菌降解拟除虫菊酯...

2.3丝状真菌的PYRs和3-PBA降解酶2.3.1PYRs降解酶微生物对PYRs的降解主要是通过产生的酶来降解,这一过程涉及水解酶和氧化还原酶,水解酶主要有酯酶、脂酶、肽酶等,氧化还原酶主要有加氧酶、过氧化物酶等。目前对丝状真菌的PYRs降解酶的研究仅停留在酶的定位、降解性能以及纯化等方面。秦坤提取了高效降解氯氰菊...

干货| 酶切实验切开 or 切不开,真的是玄学吗?

-模板DNA-1.模板DNA不纯??模板制备过程中使用到乙醇、氯仿、苯酚、SDS、EDTA等,残留在DNA模板中,会不同程度影响酶的活性,可将DNA过柱纯化。??PCR中参与扩增反应的DNA聚合酶具有外切酶活性,可能会影响酶切产物末端完整性,进而影响克隆效率,建议使用PCR纯化后的产物。

中国医科大学2024年9月《生物技术制药》作业考核试题

10.发酵过程中的化学参数有A.空气流量B.基质浓度C.菌丝形态D.黏度E.以上都不是11.被称为T细胞生长因子的细胞因子是A.IL-1B.IL-2C.IL-3D.IFN-αE.IL-412.属于培养基成分选择原则的是A.菌种的分化能力B.合适的碳氮比