疫苗前沿 | mRNA传染病疫苗最新综述
mRNA-LNP的制备流程通常包括序列合成、质粒的扩增与提取、线性化质粒模板的获得与纯化、IVT与mRNA纯化、LNP包封、灌装。具体为,合成编码目标mRNA的DNA模板,然后将其克隆到合适的mRNA生产质粒中。然后在适当的大肠杆菌菌株中扩增质粒,纯化得到质粒模板,IVT制备得到mRNA。加帽可以在在IVT过程中进行,也可以在下游步骤中进行。
前瞻性观点:核酸疫苗技术平台在预防性疫苗开发中的作用
与正常经过转录从细胞核进入细胞质的mRNA一样,LNP导入的外源mRNA也是在细胞质内与核糖体结合,完成翻译,表达抗原蛋白提呈至细胞表面或被分泌到细胞外诱发免疫应答。注射位点附近的专职抗原提呈细胞(APCs)或者被LNP-mRNA转染,或者捕获其他被LNP-mRNA转染细胞释放的疫苗抗原,随之进入引流淋巴结激活T细胞,启动抗原特异的适应...
mRNA疫苗:癌症免疫治疗新时代的曙光
体外转录(IVT)mRNA模拟内源性mRNA的结构,有五个部分,从5??到3??包括:5??cap,5??非翻译区(UTR),一个编码抗原的开放阅读框,3??UTR和一个PolyA尾。与天然真核mRNAs一样,5′端帽结构包含一个7-甲基鸟苷核苷,5′端结构会在空间上保护mRNA不被核酸外切酶降解,并与翻译起始因子蛋白协同工作,招募核糖体...
Nat Cell Biol | β细胞保护机制的突破:m^6A甲基化在1型糖尿病中...
SNO在控制METTL3功能和OASmRNA衰变中的作用(Credit:NatureCellBiology)最近的发现表明,m6A机制通过促进腺苷向肌苷(A-to-I)RNA编辑调节ADAR1或阻断内源性异常dsRNAs的合成的转变,加速成纤维细胞中I型IFN基因的周转,从而调节先天免疫反应。然而,m6A在T1D中的生物学作用,更具体地说,它们对介导β细胞先天免疫反应...
针对传染病的mRNA疫苗权威综述:诺奖得主德鲁·韦斯曼万字长文
5'帽子结构,像自然的真核mRNAs一样,包含一个通过三磷酸桥连接到mRNA5'端的7-甲基鸟苷核苷。在哺乳动物中,5'端的第一个或第二个核苷酸在核糖的2'羟基上被甲基化(2'-O-甲基化),这防止了细胞质病毒RNA传感器的识别,从而防止了无意的免疫反应。此外,5'帽子从立体上保护mRNA不被外切酶降解,并与3'端的poly...
上海科学家在基因转录终止机制研究中取得进展,成果登Nature杂志
真核细胞RNA聚合酶II(PolII)的mRNA转录终止机制非常保守,其依赖一个RNA外切酶(酵母Rat1,哺乳动物XRN2,植物XRN3)的活性,然而该RNA外切酶终止PolIImRNA合成的分子机制尚未阐明(www.e993.com)2024年11月29日。研究团队在体外重构了外切酶终止PolIImRNA合成的过程、并解析了外切酶结合PolII的转录复合物三维结构。
Nature | 张余研究组揭示酵母mRNA转录终止的机制
研究团队的工作表明mRNA的转录终止符合修正版的“鱼雷”模型,PolII类似航行的军舰、外切酶鱼雷追赶上PolII之后,吸附在PolII上,随后利用其水解RNA转化的机械力将RNA从PolII中拖拽出来。比较细菌、古菌和真核生物mRNA转录终止,研究团队提出三域生物利用相似的方式终止mRNA合成。这些终止因子均结合在聚合酶的RNA通道...
一月两篇顶刊成果 上海科学家在基因转录终止机制研究中取得进展
科研人员发现外切酶稳定结合在PolII的mRNA通道外侧，直接将PolII合成的RNA引导到外切酶的活性中心，并且外切酶的结合能够促进PolII转录延伸因子的解离，延缓PolII的转录延伸速率。据此，研究团队提出了外切酶介导真核细胞mRNA转录终止的分子机制。张余介绍，该项研究成功解析了真核生物mRNA转录终止状态的复合物结构，...
张余团队揭示核酸外切酶介导的mRNA转录终止机制
mRNA的转录终止机制在真核生物中普遍保守。当PolII转录至基因末端的多聚腺苷化信号(PolyadenylationSite,PAS)时,pre-mRNA在PAS位点下游被切割分为两段。切割后的mRNA完成PolyA加尾后被转运至细胞质翻译,而PolII仍然朝下游转录继续合成RNA,其转录终止依赖一个保守的5'-3'RNA外切酶(酵母Rat1,哺乳动物XRN2,植物...
科学家在基因转录终止机制研究中取得进展—新闻—科学网
真核细胞RNA聚合酶II(PolII)的mRNA转录终止机制非常保守,其依赖一个RNA外切酶(酵母Rat1,哺乳动物XRN2,植物XRN3)的活性,然而该RNA外切酶终止PolIImRNA合成的分子机制尚未阐明。研究团队在体外重构了外切酶终止PolIImRNA合成的过程、并解析了外切酶结合PolII的转录复合物三维结构。