热激转化(DH10B)protocol
2010年1月21日 - 生物探索
3)Add50-60μlofresuspendcellstoeachligation.Tapgentlytomix.4)Leaveonicefor15min.5)Heatshockfor90secat42℃.6)Add1mlpre-warmedorRTLB.7)Puttubesin37℃shakerfor1hr.8)Pipettecellsintoeppendorf.9)Spindownat4000...
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当心!转化实验不注意这几点,课题就要中断
2022年12月24日 - 网易
表1热激与电转的比较重点关注二:转化效率转化效率可反映出感受态细胞摄取超螺旋质粒的数量,因此转化效率会影响到克隆效率。感受态细胞具有不同的转化效率,受制备方法、所转化DNA类型、存储条件等多种因素的影响。对于大部分分子克隆实验,10??至10????CFU/??g的转化效率已经足够。对于超螺旋质粒的常...
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...发现玉米GOLDEN 2通过促进叶绿体的发育提高水稻和玉米的转化效率
2022年8月17日 - 网易
在愈伤分化阶段,转化rZmG2基因的水稻和玉米愈伤组织会提前转绿且绿点变多(图1),分化效率和转化效率显著提高。通过对转基因水稻愈伤组织的RNA-seq和RT-qPCR分析发现,rZmG2主要通过促进叶绿体发育相关基因的表达来提高水稻的分化效率。此外,对转化体幼苗进行热激处理,可实现rZmG2基因及其筛选标记基因表达盒的自删除,以避...
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在脉冲之后,尽可能快地取出电穿孔电击池
2020年3月29日 - 百家号
14.在脉冲之后,尽可能快地取出电穿孔电击池,加入1mL室温下的SOC培养基。一些研究者相信,添加室温下的培养基提供了热激,提高了转化效率。15.将细胞转移到17mmX100mm或17mmX150mm聚丙烯管,在37"C温和旋转培养lh。16.将不同体积的转化混合物与--份200μL预热的无菌培养基混合。将每个混合物涂到含有20...
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