B细胞培养攻略

将分选的B细胞以1.3-4个细胞每孔的密度接种到384孔板中,每个孔含有50μL的完全培养基。384孔板最外围一圈加入100μL无菌水以防止液体蒸发。完全培养基配方:3.5mLIL-2(10000U/ml)+175μLIL-21(100μg/ml)+10ml辐射处理过的3T3-msCD40L细胞(共3.5x107cells)+336mLCompleteIMDM培养基。d)...

推荐:EMEM培养基@2024资料已更新

EMEM(MEM+NEAA)完全培养基:培养1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);3.在距离紫外灯直射范围内20-30厘米处照射2-3小时;4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;...

河南中医大: 基于Rac1信号研究淫羊藿苷对慢性阻塞性肺疾病模型...

手术剪分离小鼠气管,横剪“一”字小口后,用5mL注射器将4℃预冷的PBS缓慢注入肺内进行肺泡灌洗,收集BALF至15mL尖底离心管内,1500r/min离心10min,用1mL完全培养基重悬,转移至6孔板内,收集贴壁细胞即为小鼠肺泡巨噬细胞。

树突状细胞(DC)培养攻略

·吸出预接种OP9细胞的培养基,并用200μlCD34+细胞悬浮液(3000个细胞)替换,继续培养;·第6天,每个孔中取出100μl培养基,并用100μl预热的DC分化培养基(αMEM,10%FBS,1%penicillin-streptomycin,100ng/mlFlt3L,20ng/mlSCF,20mg/mlGM-CSF)替换;·在第12-21天收获细胞,并且可在...

免疫卫士——T细胞培养攻略

b)每孔加入500μL含1%BSA的PBS溶液进行封闭,室温30min,结束后用无菌PBS洗涤1次;c)PBMC接种于上述24孔板中,接种密度1*106/mL,培养体系为含10%热灭活胎牛血清、1%双抗、3μg/mLanti-humanCD28、100IU/mLhumanIL-2的RPMI-1640培养基;...

Protocol:胰腺癌类器官构建方案|基质|解离|红细胞|肿瘤细胞_网易...

图1:处理新鲜组织样本建立肿瘤类器官(www.e993.com)2024年11月19日。肿瘤类器官制备过程的流程图,从组织消化到类器官的培养。1.将6孔培养板放入37℃细胞培养箱中3h后,再移入类器官。2.测量,拍照,并用3mLadvancedDMEM/F12,添加5%胎牛血清(FBS),15mMHepes,1%L-谷氨酰胺,1%S/P,125ng/mLAmphotericinB,0.1mg/mLNormoci...

如何在24孔板中做细胞迁移实验?这个方法请收好!

6.用移液管将1ml细胞培养基加到24孔板的每个孔中。图3使用无菌镊子取出2孔培养插件3.1第3步:获取显微镜图像我们建议录制延时视频,以确定时间依赖性和细胞迁移的特征。1.将μ-Plate24孔培养板放在显微镜上并确定所有24个孔的位置。2.在接下来的几个小时内多次拍摄图像,开始观察过程。在24小时内每30...

崔文国 | 可注射水凝胶微球治疗骨关节炎的实验研究|骨关节炎|HAMA...

1.6.1软骨细胞炎症模型构建取浓度为5×105个/mL的软骨细胞悬液接种于6孔板中,每孔2mL,同时加入浓度为20ng/mL的IL-1β。采用DMEM培养基于37℃、5%CO2条件培养0、6、12、24、48h后,采用实时荧光定量PCR检测Ⅱ型胶原mRNA相对表达量。具体步骤:采用Trizol试剂提取细胞总RNA,分别在260nm和280nm处测定A值...

胰腺癌中OASL的表达及其对癌细胞增殖和迁移的影响

shRNA转染:当细胞生长状态良好,覆盖培养皿约90%面积时,吸去培养皿中的培养基,用PBS洗涤2次,胰蛋白酶消化细胞,再加入完全培养基配制成细胞悬液,以每孔3×105个细胞接种到6孔板内进行培养,培养24h后,当每孔细胞密度达到70%~80%,弃掉培养基,每孔加入2ml新鲜的完全培养基。取一个EP管,按照说明书以每孔加...

亚微米二水草酸钙晶体与肾上皮细胞之间的相互作用|草酸钙晶体|肾...

向两组加入含有COD微晶(浓度为100μg/mL)的无血清培养基。在粘附2,6,12,18和24小时后,使用细胞计数Kit-8方法测定细胞活力。用MDA测试试剂盒测定丙二醛(MDA)含量。通过荧光定量法测定细胞表面的OPN表达。使用纳米颗粒尺寸分析仪测定COD晶体的zeta电位。通过SEM观察Vero-COD粘附,并通过ICP定量分析粘附COD微晶的量。