实验干货--原位杂交选择指南
而非同位素标记探针虽然在敏感性方面不如同位素标记探针,但其稳定性和分辨力高,检测时间短,一般在24h即可得到结果,同时操作简便,没有放射性污染的安全问题。因此,非同位素标记探针(尤其是生物素标记探针和地高辛标记探针)迅速发展,逐渐成为原位杂交技术的主流方法,更受科技工作者的关注与青睐。三、原位杂交选择指南1...
利用新型LoopRNA技术对细胞和组织中的特定核酸序列进行空间定位
正义探针(靶DNA)和反义探针(靶DNA和RNA)的信号比较表明,针对HPV16/18的反义探针在SiHa(1,3拷贝的HPV)细胞中产生了更强的信号。在C33(无HPV拷贝)细胞中没有检测HPV16/18的情况下确定了特定其特异性(图3)图3:A.用AMPIVIEW??HPV16/18正义RNA探针检测HPV16/18B.用AMPIVIEW??HPV16/18反义RNA...
原位杂交仪概述及其DNA或RNA杂交实验中发挥的重要作用
首先,需要选择合适的核酸探针和标记物,确保探针与目标序列的互补性和特异性。其次,需要控制杂交温度和时间,避免过高或过低的温度对杂交反应产生不良影响。此外,还需要注意样品的处理和杂交后的检测方法,避免产生假阳性或假阴性结果。总的来说,原位杂交仪是DNA或RNA杂交实验中不可或缺的重要设备。它为实验者提供了稳...
原位杂交仪可用于了解DNA或RNA序列在细胞组织中的定位表达
不同的原位杂交仪可能适用于不同类型的探针,如DNA、RNA探针或蛋白质抗体。3.灵敏度和分辨率:-考虑您对实验结果的灵敏度和分辨率要求。一些仪器可能具有更高的灵敏度和分辨率,适用于需要结果的研究。4.自动化程度:-考虑是否需要自动化功能。一些原位杂交仪具有自动化的样本处理、显微镜图像采集和数据分析功...
遗传学检测方法比较:荧光原位杂交(FISH)vs 微整列比较基因组杂交...
提取细胞或组织样本,通过固定和制片的过程使样本处于适合杂交的状态。需要根据不同的样本类型选择不同的预处理方式:??细胞或组织的固定??脱蜡(FFPE组织)??抗原的修复??酶促透化作用部分相关产品推荐:2.杂交将荧光标记的DNA/RNA探针加入到制备好的样本上,并在特定的条件下促进探针与目标序列的...
沃信VOSHIN-300Y型原位杂交仪可用于DNA原位杂交实验
二、其次,原位杂交仪也可用于RNA原位杂交实验(www.e993.com)2024年9月7日。RNA原位杂交技术类似于DNA原位杂交,但使用的是标记的RNA探针。这种技术主要用于检测细胞或组织中特定RNA的表达和定位。例如,在神经生物学研究中,研究者可以利用RNA原位杂交技术观察神经元内特定mRNA的分布和表达水平,从而揭示神经元的功能和通讯机制。
如何制备原位杂交ISH 整体实验方案
RNA探针长约250–1500bp;长度为800bp左右的探针具有较好的灵敏度和特异性。转录模板应支持探针(反义链)和阴性对照(正义链)RNA的转录。将转录模板克隆至包含对生启动子的载体可实现这一目的。制备探针之前,必须对环状模板进行线性化,但也可使用PCR模板。DNA探针:DNA探针为原位杂交提供较高的灵敏度。与...
原位杂交实验(质粒制备和cRNA探针的标记)
1.8,高于2.0则可能有RNA污染,低于1.8则有蛋白质污染。;DNA浓度=OD260X0.05X稀释倍数(μg/μl)。26.质粒DNA溶液于-20℃保存待用。一、质粒制备1质粒的转化和扩增1.1制备XL1-Blue感受态细菌1.取400uLXL1-Blue菌种加入到含200mlLB培养基的锥形瓶中,37℃、100rpm培养4h,离心,倒置,以冰冷的0.1mol/LC...
病理干货 | RNAscope技术在肿瘤精准诊疗中的应用
然而,与药物毒性或机制相关的生物标志物的核酸探针都可以快速开发和验证,因此RNA原位杂交技术成为一种潜在的替代IHC的检测方法。研究表明,全自动RNAscope可用于检测几乎任何候选药物靶点和生物标志物,用于临床前安全性和毒性评估(见图4)。图4:PPIB在多个不同大鼠组织中的代表性图像...
原发性癌症鉴别诊断,RNAscope 技术到底有多牛
与传统的RNA原位杂交相比,RNAscope技术属于新一代RNA原位杂交技术,其特异性的双Z探针设计避免了传统长链RNA探针的弊端,配以自身级联放大检测原理,可以高效敏感地检测到目标RNA。该方法的具体优势如下:①应用广泛:使用RNAscope技术,靶点RNA为大于等于300个碱基的特异序列,即可进行探针设计。因...