《食品科学》:天津科技大学范晓光教授等:代谢工程改造大肠杆菌...
研究通过基因组编辑和组成型质粒表达方式,构建1株遗传背景清晰、无营养缺陷、无需诱导的大肠杆菌基因工程菌,以期实现NAM为前体发酵生产-NMN。1减少底盘细胞对前体和产物的额外消耗NAM是-NMN合成的重要前体,大肠杆菌中pncA编码的烟酰胺酶可以催化NAM脱酰胺生成烟酸,是NAM的主要支路代谢。因此,首先敲除...
...利用纳米孔测序技术首次在蔬菜中发现新型多重耐药质粒
9株blaNDM阳性分离株中,有8株blaNDM基因可通过接合试验转移至受体菌中,其中4株菌中blaNDM基因位于在IncX3质粒上,另外4株菌中位于在IncHI2质粒上,仅有1株大肠杆菌(GDSC2239PM)中blaNDM-5基因不可水平转移。利用齐碳纳米孔测序平台结合二代测序平台获得了9个blaNDM基因阳性质粒的完整序列,包括4个IncX3型质粒(pHN1...
「星耀小课堂」一文读懂|IVT RNA质粒模板序列设计全解析
抗性基因对于阳性克隆的筛选和质粒的维持至关重要。质粒转化为大肠杆菌是一个低效的过程,因此需加以抗性基因等选择性标记筛选含有目标质粒的重组菌落。此外,从细菌生长的角度来看,质粒的存在可能是不利的,因而会导致一定程度的质粒丢失,而添加抗生素能够维持质粒的存在。《中华人民共和国药典》明确要求,除另有规定外...
正视细菌耐药性问题!抗微生物药物不宜作为预防水产动物疾病的药物...
有研究报告指出,动物源大肠杆菌的耐药谱,普遍较人源大肠杆菌的耐药谱更为广泛,而且耐药强度也比人源大肠杆菌强。这种现象说明,由于执业兽医们在临床上采用大剂量、大范围、种类无限制地使用抗微生物药物,已经导致了动物源性病原菌耐药现象异常严重;另一方面也说明来自养殖动物的病原耐药问题,较人源性病原菌的耐药问题...
新发传染病与疫苗新技术
质粒基因组骨架通常含有允许其在大肠杆菌中复制和选择的元件,即支持质粒高拷贝的复制起点和选择标记。由于人用质粒载体中的非功能性序列,特别是抗生素抗性标记物存在安全隐患,标记物已在新一代DNA疫苗中被替换或去除。真核表达盒由5'启动子、目的基因和3'聚腺苷酸化(polyA)信号组成。5'启动子通常来自...
综述:细菌群落中抗菌药物耐药基因的水平转移
例如,Barr等人首次报道,所用的全部五种b-内酰胺类抗菌素(青霉素、甲氧西林、氨苄西林、萘夫西林和头孢拉定)的亚抑制浓度使四环素抗性质粒tet-r的转运频率从100倍提高到1000倍,这可能是由于金黄色葡萄球菌的细胞聚集作用增强所致(www.e993.com)2024年10月1日。环丙沙星和丝裂霉素C增加了大肠杆菌和嗜热链球菌中氯霉素抗性ICEs...
mRNA疫苗的发展历程与作用机制
第一步:DNA质粒制备原液制备开始于质粒构建。通常使用的DNA质粒为环状质粒,质粒上含有设计好的序列模块,其中包括刺突蛋白编码。利用电流打破细胞膜,并将环状DNA质粒引入大肠杆菌。此后,大肠杆菌被储藏于含有大量营养物质的溶液中进行繁殖扩增。大肠杆菌每20分钟分裂一次,4天内可以得到数万亿DNA质粒。提取并纯化DNA质粒...
干货| mRNA疫苗药物超全知识汇总
第一步:DNA质粒制备原液制备开始于质粒构建。通常使用的DNA质粒为环状质粒,质粒上含有设计好的序列模块,其中包括刺突蛋白编码。利用电流打破细胞膜,并将环状DNA质粒引入大肠杆菌。此后,大肠杆菌被储藏于含有大量营养物质的溶液中进行繁殖扩增。大肠杆菌每20分钟分裂一次,4天内可以得到数万亿DNA质粒。提取并纯化DNA质粒,...
滴度达115.87 g/L,低盐环境下工程谷氨酸棒杆菌高产四氢嘧啶
为了实现ectBAC基因簇的有效表达,使用质粒pJYS3-de3将来自大肠杆菌BL21(DE3)的de3基因插入谷氨酸棒杆菌ATCC13032的基因组中,成功实现了谷氨酸棒杆菌合成四氢嘧啶。接下来是进行底盘设计来进一步提高四氢嘧啶产量。为了增加四氢嘧啶合成通量并提高前体和氧化还原辅因子的可用性,可以通过敲低、减弱或解除反馈...
【陈巍学基因】视频:PACE 噬菌体辅助基因连续进化方法
这些带变异的目标蛋白与AP质粒上的启动子尝试结合。带变异的目标蛋白中,如果某个蛋白能启动AP质粒上gIII基因的表达,那它所在的大肠杆菌就会产生出pIII蛋白。有了pIII蛋白,就可以包装出有感染力SP噬菌体。这些噬菌体能够感染下一轮的大肠杆菌,并且产生出更多的子代与孙代的噬菌体。