和元生物获得发明专利授权:“一种提高大肠杆菌裂解过程中质粒稳定...

2024年5月4日 - 证券之星

具体步骤如下:1)菌体重悬,所述重悬液含二糖类化学物质;2)碱裂解;3)中和;4)澄清;5)浓缩换液;6)分子筛层析;7)制剂换液。本发明的工艺简便,通过在菌体重悬液中添加一定浓度的二糖(如蔗糖、海藻糖等),保护大肠杆菌碱裂解过程中的超螺旋质粒,进而简化下游层析纯化工艺,并提高质粒回收率,方便快捷,适于推广应用。

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“双非”高校,唯一单位发Nature Sustainability!|活性|催化剂|...

2024年7月17日 - 网易

作者使用大肠杆菌细胞来进行研究,因为它们含有具有电催化ORR活性的膜间细胞色素c蛋白。为了提高细胞色素c的浓度和细胞外界面电子转移效率,作者采用了基因和纳米工程手段。将含有编码cytc蛋白的torY基因的质粒转入野生型(WT)细胞,以获得工程型(ET)细胞(图1)。在质粒中,强T7启动子导致ET细胞中的cytc转录和翻译率高...

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WHU-Antiphage战队:大肠杆菌BL21(DE3)的抗噬菌体改造丨合成生物学...

2023年7月26日 - 腾讯新闻

由于质粒的构成相对于细菌的DNA要简单的多,所以看起来如果我们可以通过质粒来表达外源基因的话就十分省时省力。然而,质粒在工程菌生产发酵过程中容易丢失,并且质粒的抗生素抗性会给工程菌株带来代谢压力,所以我们需要进行基于基因组整合的改造策略。涉及基因组整合,我们采用高温和蔗糖致死的pkov质粒进行整合,在BL21(DE3)基...

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质粒转化大肠杆菌

2010年3月28日 - 生物探索

2.为扩增质粒和其它载体作准备。由于大肠杆菌繁殖快,在适宜的条件下繁殖一代仅需要20~30分钟,而且常用质粒可以在大肠杆菌中达到几百个拷贝,因此,通过对转化成功的大肠杆菌培养,可以在短时内极大地扩增目的质粒。(作为分子生物学用大肠杆菌,是经过实验室改造过的工程菌。)实验原理本实验通过CaCl2对特定的大肠杆菌处...

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生物质粒的规模化发酵生产

2023年7月3日 - 新浪

转自:楚天人近年来随着基因/细胞治疗的突破以及mRNA疫苗的火热问世,对质粒的需求和大规模生产的要求愈发迫切,因此质粒的规模化生产显得尤为重要。质粒DNA通常是在上游生物工艺中由大肠杆菌在发酵系统中生产,一般支持病毒载体和mRNA疫苗制造的质粒生产规模都在几十升至上百升,进行高密度发酵,对发酵生产设备要求较高。大...

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超螺旋质粒DNA纯化方案 (高质量高纯度质粒的制备)

2023年5月31日 - 百家号

质粒DNA基因治疗药物是以质粒DNA为载体的基因治疗产品，一般选择大肠杆菌作为宿主细胞，提取出的质粒中DNA会以多种形式出现：超螺旋质粒DNA(scDNA)、开环DNA(ocDNA)、线性DNA和质粒DNA聚集体等(www.e993.com)2024年11月19日。另外，还伴随有宿主蛋白(HCP)、宿主核酸(HCD)、RNA、内毒素等杂质。其中超螺旋质粒DNA（scDNA）是我们的...

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江南大学团队改造大肠杆菌生物合成藻蓝胆素达147.0 mg/L

2023年5月10日 - 网易

第一,在生物合成过程中,前体供应是提高后续目标产物效价的关键因素。“以往的研究已经在大肠杆菌中实现了血红素的高效合成,但大量质粒的使用不仅对菌株造成较大负担,而且消耗了大量可用质粒。因此,使用替代方法来增强前体血红素的合成至关重要。”将异源DNA整合到基因组中可以实现稳定表达并解决质粒的负担,研究人员通...

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专注清洁基因组大肠杆菌生产,Scarab已开发17款产品涉足四大应用...

2021年5月14日 - 网易

噬菌体和IS元件均可在生产过程中被激活,从而导致不一致的发酵结果。IS元件还可以转座到质粒产物中,改变治疗剂的序列和功能,导致细菌IS元素可能在给药后进入哺乳动物基因组。通过在pDNA生产的所有步骤中使用大肠杆菌的多个缺失菌株(MDS)可消除这些问题。将这些菌株经过精确设计,即可去除所有噬菌体和转座序列。

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3管大肠杆菌基因克隆质粒被查获均为非法邮寄入境生物实验材料

2021年12月22日 - 新浪

#3管大肠杆菌基因克隆质粒被查获#均为非法邮寄入境生物实验材料12月22日,据海关总署消息,近日,长沙邮局海关从进境邮件中,查获3管大肠杆菌基因克隆质粒,均为非法邮寄入境的生物实验材料。这种生物制品是我国法律法规禁止携带邮寄入境物品,科研用途的合法引进需要事先在海关总署办理审批手续。(记者:马骏制作:李霞玲...

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碳青霉烯类耐药性在人源和动物源产NDM酶大肠埃希菌间的传播丨...