为度创新突破|磁珠法血液基因组DNA提取试剂盒实现技术革新

1.纯度高：DNA占比接近100%，无需进行Qubit检测，仅需Nanodrop检测即可准确定量基因组DNA含量。2.体积灵活：无需调节提取试剂体积和操作流程，可从50-300μL体积样本中提取基因组DNA。3.简单方便：无需加入蛋白酶K，简化操作流程和保存条件。4.高效快速：全流程仅需30分钟，可同时处理32或96份样本。5.流...

...蛋白创建CRISPR-Cas蛋白开关用于激活型基因编辑和病毒蛋白酶检测

通过病毒蛋白酶介导的CasPS切割,成功恢复了Cas12a的活性,并利用其持续切割单链DNA报告基因实现信号的高效放大,进而通过荧光或试纸条实现信号的快速读取(图6A)。实验结果显示,基于CasPS的3C蛋白酶检测限低于1×10-3U/μL,相较于传统多肽探针方法,检测灵敏度提升了20倍以上,且信号强度显著增强,达到9.6-28倍(图6B-...

各种HIV药物的“前世今生”

HIV-1蛋白酶由99个氨基酸组成,可裂解Gag和Gag-Pol聚合物的祖细胞,产生成熟的活性蛋白质。大多数HIV蛋白酶抑制剂在肝脏中通过细胞色素P450(CYP450)酶进行代谢,该酶具有抑制药物代谢酶CYP4503A4(CYP3A4)的强大潜力(Dash和Boix,2021),从而抑制HIV在体内的繁殖并获得抗病毒作用。沙奎...

核酸提取加蛋白酶K有什么好处?遇“复杂样本”更显身手

蛋白酶K增加核酸提取量可能的原因为:(1)复杂样本(如:痰液样本)中存在着一些可PCR反应的物质(可抑制PCR的物质,例如糖蛋白,免疫球蛋白等物质就是PCR的抑制物),使用了蛋白酶K可最大程度清除该类物质,保证PCR结果准确性;(2)复杂样本的核酸提取过程中,易残留较多RNA酶,使用蛋白酶K可最大程度灭活RNA酶,防止病毒...

达安科普:详解新冠核酸快速检测提取中的蛋白酶K

所有提取试剂内都含有蛋白酶K吗?不是的,由于提取试剂工艺及需求的不同,部分提取试剂不含蛋白酶K,蛋白酶K需要额外手工添加。在进行新冠核酸快速检测中,目前发布的专家共识及国家文件都提及了在进行新冠核酸快速检测中推荐使用蛋白酶K。历经多年,达安基因不断丰富和完善核酸提取或纯化试剂,可为不同应用场景提供优质、...

一文了解蛋白酶K!

在实现规模化工业生产的前提下,蛋白酶K还可以替代作用范围较窄的其它蛋白酶,应用于工业制革、食品加工、饲料生产、造纸等行业中(www.e993.com)2024年11月18日。另外,蛋白酶K也可以替代传统的可能存在污染的化学方法处理原材料,去除不必要的蛋白质杂质。蛋白酶K目前主要应用于基因诊断试剂盒、基因组DNA提取试剂盒、RNA提取试剂盒中去除核酸酶和...

基因组DNA的提取(有机溶剂提取法和Chelex-100提取法)

②取10~20g组织剪碎,加入2mlSTE,用匀浆器研磨制成单个细胞匀浆。注意事项:为减轻机械剪切力对DNA的损伤,应尽量温和操作,缩短均浆时间。2.消化处理后的样品中加入1/10体积的10%SDS和1/20体积的20mg/ml的蛋白酶K,使终浓度分别为1%和100μg/ml,置于55℃温水浴中3～4h。

从受威胁的啮齿动物中收集DNA的非侵入性有哪些替代方法?

洗脱液由10mmTris-HCI和0.5mm乙二胺四乙酸组成,从尾炎中提取尾组织基因组DNA,使用以下修改进行起诉。每个样品在360uL缓冲液ATL中消化至少24小时,60pL蛋白酶K,溶解后将溶出物在20000xg离心5分钟。将上清液转移到用于后续提取步骤的新管中来调整增量,ED体积的ATL和蛋白酶K,400uL缓冲液AL和400uL乙醇用于确保DNA...

蛋白酶K预处理在RT-PCR中的应用探讨

在临床实践中,利用蛋白酶K(PK)进行标本的预处理,提高核酸提取效率,从而提高阳性标本检出率是常用的方法。而关于PK预处理是否可以提高核酸提取效率,国内外所做研究报道较多,但结论并不一致。下面就核酸提取前是否需要加入PK预处理进行实验并探讨其应用。实验设计...

什么样本的核酸最难提?不是「污染样本」(附有奖答题)

5.蛋白酶K组织消化很关键蛋白酶K可以消化FFPE样本中与DNA结合的蛋白质组分,将DNA释放出来,并降解样本中可能存在的任何核酸酶,因此这个步骤还可防止DNA发生降解。消化的时间过短,DNA的释放不充分,导致核酸提取的得率低,通常采用56℃条件下孵育1h,QIAGEN第二代FFPE样本纯化试剂盒...