上海交大夏小霞教授/钱志刚研究员AFM综述:人工蜘蛛丝材料的创制
夏小霞-钱志刚联合研究团队使用代谢工程手段,通过增加甘氨酰-tRNA的供应并采用低温诱导表达策略,大幅提高了大肠杆菌胞内合成高分子量重组蛛丝蛋白的产量,达到3.6g/L。之后,为了简化蛋白质纯化工艺,课题组首次开发了谷氨酸棒状杆菌的蛛丝蛋白胞外分泌平台,实现了高水溶性的重组蛛丝蛋白生产,为工业化生产奠定了基础。图2...
《食品科学》:扬州大学孟祥忍教授等: 芝麻蛋白Ses i 3的重组表达...
此外,目的蛋白在37℃和15℃都是以包涵体的形式存在并且表达量差异不大,因此,选择大肠杆菌生长常规最适温度37℃作为诱导表达条件。包涵体蛋白溶解透析复性后,用镍离子吸附柱纯化带有His标签的重组芝麻过敏原Sesi3蛋白。由图2B可见,经过纯化后,在66kDa附近基本没有出现目的蛋白条带以外的其他蛋白,因此达到预期...
《食品科学》:天津科技大学范晓光教授等:代谢工程改造大肠杆菌...
-NMN产量最高(0.90g/L),但生物量最低,这可能与该酶是噬菌体来源有关。与之相比,引入CbNampt菌株N-13的-NMN产量达到0.88g/L,但生物量与N-16相比提高了1.3倍。研究进一步证实,Comamonadaceaebacterium来源的Nampt在大肠杆菌中的作用效果最好,能够在保证细胞生长的同时提升-NMN的发酵产量。4加强PRPP...
灵蛛科技|通过「发酵和家蚕」两条技术路径高效量产蛛丝蛋白纤维
“经过四年的研发和实践,灵蛛科技蛛丝蛋白产量从最初的100mg/L到现阶段的10g/L以上,目前已经实现了工业规模,3000L发酵的收率能够稳定在15g/L以上,目前正在突破20g/L收率大关。值得一提的是,近期我们通过菌株优化和发酵条件迭代调优,在中试规模中我们已经突破了30g/L的蛋白收率。...
FSHW | 自诱导动态调控异源蛋白表达:群体感应系统的构建及优化
当只有PluxI存在时,菌株没有检测到荧光,而当群体感应元件PluxI、luxI和luxR都存在时,荧光强度为6600au,证明群体感应系统发挥作用需要完整的元件组成,因此在大肠杆菌中构建完整的基于群体感应系统的自诱导动态调控系统(SIDRE)。将原始启动子PluxI更换为组成型弱启动子PBB控制表达的菌株荧光强度为9300au,是原始...
系报道最高水平,江南大学工程化大肠杆菌合成3′-唾液乳糖
研究者筛选了七种不同的RBS序列,并分别替换到目标基因pm0188的原始RBS上,然后将这些RBS插入到大肠杆菌中,观察对3′-SL产量的影响(www.e993.com)2024年9月7日。结果发现,含有RBS(BBa_J01080)的菌株BZAPKA9产量最高,达到8.39g/L,比对照组提高了36.6%。
科前生物2023年年度董事会经营评述
其中实现了基因工程亚单位抗原2000L发酵罐高密度发酵、纯化及内毒素去除工艺,抗原表达量、纯度、内毒素去除均较之前提高明显;实现猪流行性腹泻病毒、猪轮状病毒和猪丁型冠状病毒2500L大型反应器全悬浮无血清培养工艺,抗原效价高且稳定;实现猪伪狂犬病毒5500L大型反应器全悬浮低血清培养工艺,血清使用量大幅下降,在保证...
余方友教授:临床耐药菌研究前沿
全基因组测序显示,我国ST764最常见的葡萄球菌蛋白A(spa)类型为t002(55.78%)和t1084(40.38%)。毒力测定表明,ST764-t1084菌株具有较高的溶血活性和α-毒素水平。在影响α-毒素产生的关键调控因子中,只有SaeRS在ST764-t1084分离株中高表达。小鼠脓肿模型表明,ST764-t1084分离株的毒力与以高通气性著称的金黄色...
《食品科学》:四川农业大学刘书亮教授等:丝状真菌降解拟除虫菊酯...
大肠杆菌是常用的原核表达系统的宿主,具有操作简单、技术成熟、周期短、表达量大等优点,但是对来源于真核生物的基因在进行表达时常出现蛋白质无法正确折叠,缺少糖基化修饰等问题,形成不溶的无活性的包涵体。如真核CYP450大多数位于线粒体或内质网的膜蛋白上,难以在大肠杆菌中实现可溶性表达,这主要是因为真核CYP450的...
肠道里的“蝴蝶”及其蝴蝶效应与压力有何关系?
WAS是一种强烈的心理压力因素,会破坏肠道上皮紧密连接的完整性。与其他压力模型相比,单独的WAS对行为产生的影响不大。然而,WAS会影响粪便微生物组,导致拟杆菌门减少、厚壁菌门增加和变形菌门增加。当分析小肠和结肠的内容物时,WAS小鼠的乳杆菌科和未分类的拟杆菌门数量较低。