大规模新冠核酸筛查中出现的异常扩增曲线分析
曲线如倾倒的“S”型,呈现先下降再上升后下降的特点,形似光滑的波浪状。2原因分析:仪器的自动基线设定为6-12循环,因样本病毒核酸载量高,扩增曲线起跳早,位于或早于基线循环处,导致曲线异常。3解决方案:该类型曲线需手动调整基线范围,将基线设定前移至合适循环,重新分析。3小“S”型1曲线特点:曲...
如何解析新冠核酸检测中的异常扩增曲线?
扩增曲线良好的指标是曲线拐点清楚,扩增曲线整体平行性好,基线平而无上扬现象。理论上,PCR每个循环后扩增产物量即增加一倍,扩增曲线应表现为荧光值随着循环数增加而不断上升,而实际上扩增曲线的荧光值并不会随着循环数的增加而无限上升。这是由于PCR扩增进行到一定阶段,反应体系中的原料发生消耗和变性,如dNTP和酶等...
新冠核酸检测中的11种异常扩增曲线
扩增曲线良好的指标是曲线拐点清楚,扩增曲线整体平行性好,基线平而无上扬现象。打开网易新闻查看精彩图片理论上,PCR每个循环后扩增产物量即增加一倍,扩增曲线应表现为荧光值随着循环数增加而不断上升,而实际上扩增曲线的荧光值并不会随着循环数的增加而无限上升。这是由于PCR扩增进行到一定阶段,反应体系中的原料发生...
PCR实验室空闲了,但是如何评估扩增效率还是要理清楚的
而PCR的特点是反应初期目标DNA分子呈现指数增长,这个阶段的扩增效率可以无限接近于1;随后由于反应组分消耗或聚合酶活性下降或两者共同作用,导致反应效率逐渐下降并最终停止。不管是定量DNA分子初始量,还是计算表达量差异,都需要精确评估PCR扩增效率。图1:扩增曲线。注:指数期内,每个循环PCR产物量大约增加1倍,该阶段的...
检验人,那些令人犯晕的PCR异常曲线这里都讲了!
1.曲线拐点清楚,特别是低浓度样本指数期明显,扩增曲线整体平行性好,基线平而无上扬现象,低浓度样本扩增曲线指数期明显。2.曲线指数期斜率与扩增效率成正比,斜率越大扩增效率越高。3.标准的基线平直或略微下降,无明显的上扬趋势。4.各管的扩增曲线平行性好,表明各反应管的扩增效率相近。
全面解读新冠病毒核酸检测要点,为何会出现假阴性、复检阳性?
3、Ct值37~40为灰度区,建议重复实验,若重做结果Ct<40,扩增曲线有明显起峰,该样本判断为阳性,否则为阴性(www.e993.com)2024年9月21日。之后的第三版指南[8]、第四版指南[9]延续了上述标准,但是由于商品化试剂盒选用的靶标有所不同,上述3版指南并未给出靶标的组合判断标准,强调以厂家提供的说明书为准。从第五版指南[10]开始,明确了...