揭开“内标”未出之谜|荧光|扩增|试剂|核酸|pcr_网易订阅

本次实验之所以会认为内标基因未出,和我们分子室日常工作习惯也很有关系,一般情况下我们观察的曲线为仪器数据优化处理后的扩增曲线,而非原始荧光曲线。优化处理后的扩增曲线为PCR扩增仪对实时监测到荧光信号进行平滑处理、去除噪声和异常值等操作,通过对这些数据优化处理,可以使得扩增曲线更加平滑、清晰,更容易进行分析和...

qPCR 曲线「丑」到拿不出手!除了引物,这些问题也要注意

Ct值过低:可能是模板浓度高,引物设计不合适。因此应减少模板量或稀释cDNA,优化程序避免非特异性扩增。CT值重复性差:仪器、试剂、耗材、实验操作细节等众多因素,具体问题具体分析。3.qPCR扩增曲线异常:正常扩增曲线应呈平滑S型。常见异常包括扩增曲线锯齿状(RNA浓度低或体系含有杂质);无法到达平台期(...

新冠内标扩增反应曲线呈锯齿状,原因是……

1.扩增曲线不光滑如图8。主要有两个原因:(1)扩增信号太弱,经系统矫正后,就会产生不平滑的线,可以通过提高模板浓度重复实验。(2)仪器本身的问题,可能在扩增过程中仪器出现波动或者检测孔本身出现异常。图8(图片来源于网络)2.扩增曲线呈锯齿状且不连续如图9。原因是典型的ROX添加不当导致的异常结果。图9(...

PCR异常扩增曲线案例分析与解决办法盘点!

基线不平滑,整体扩增信号杂乱,感觉整个扩增效果有点被抑制的情况。02分析:从整体来看整板扩增效果不是特别理想,然而进行样本单独分析时,发现问题仅出现在几个标本身上,这几个标本很多都是处于同一条八联管,抛开这几条有问题的八联管进行分析时其余结果未见异常曲线。03解决:受影响的标本进行复查,结果正常;...

货出不去、款回不来,外贸工厂受困国际物流

中国的出口贸易一直是增长，新冠疫情这两年集装箱需求量大。但是，疫情总归会过去的，到时候空箱流转才能正常。不过，什么时候才能真正的过去，现在很难做出准确的判断。可以肯定，疫情总归会结束，集装箱需求也会有一个拐点，这个转折过程可能是一个平滑的曲线。（应受访者要求，文中梁文锦、郭嘉为化名）

伴随诊断行业研究:核心技术突破不断,伴随诊断迎高速发展期

应用荧光染料:SYBRgreen:在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步(www.e993.com)2024年11月5日。应用特异标记探针:TaqmanProbe:PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特...

微生物扩增子测序图表解读(实例数据)

物种的丰富程度由曲线在横轴上的长度来反映,曲线越宽,表示物种的组成越丰富;物种组成的均匀程度由曲线的形状来反映,曲线越平坦,表示物种组成的均匀程度越高。如果曲线越平滑下降表明样本的物种多样性越高,而曲线快速陡然下降表明样本中的优势菌群所占比例很高,多样性较低。

Pubmed GIST文献月评第七十四期(Jan 2023)

作者认为平滑肌瘤内GIST发生的可能机制包括。(1)ICC的增殖可由平滑肌瘤以旁分泌方式产生的生长因子或细胞因子诱导,并可转化为关键遗传事件(如KIT或PDGFRA突变)导致的肿瘤过程。(2)目前的GIST和平滑肌瘤可能起源于共同的祖细胞,或者其中一个可能代表另一个的转分化。(3)目前的GIST和平滑肌瘤是具有独立发病机制的碰...

“重大科学仪器设备开发专项”2022年度申报指南征求意见(全文)

考核指标:频率范围10MHz～110GHz;噪声系数测量范围0～30dB;噪声系数测量不确定度≤0.1dB;增益测量范围-20dB～+40dB;增益测量不确定度≤0.15dB;测量带宽10MHz/5MHz/3MHz/2MHz/1MHz/500kHz/300kHz/200kHz/100kHz,噪声源超噪比15dB±8dB。项目完成时通过可靠性测试和第三方异地测试,平均故障间隔时间≥3000...

智能汽车产业143页深度报告:变革已至,百年产业秩序重塑

2)智能化系电动化重要促进:新能源汽车发展初期,里程焦虑问题很大程度左右消费者购车决策,但伴随电池技术突破、整车续航里程提升,续航里程对于消费者购车影响程度(尤其在一些基础设施相对完善的一二线城市)已不显著。为寻求产品差异化卖点,新老势力开始将目光锁定智能,寄期通过智能化加速自身电动化进程。汽车智能...