信得科技检测团队在中科院Top期刊《Poultry Science》上发表最新...
为了检测cycleaveqPCR的敏感性,将两个质粒分别做102~1011连续稀释,作为cycleaveqPCR和常规PCR的模板,以无菌水作为阴性对照。为了确定cycleaveqPCR的重复性和稳定性,将pts-11和pnon-ts-11质粒10倍倍比稀释(104~106)作为cycleaveqPCR的模板;在批内和批间重复试验中,每个样品设置3个重复。批间重复试验的时间间隔...
闲谈sbeadex?? 核酸提取纯化试剂盒
所有sbeadex试剂盒均使用表面修饰的超顺磁性磁珠,通过一种新型的两步结合机制结合核酸,如下图所示:sbeadex核酸提取原理首先,核酸通过极性相互作用吸附在磁珠上,其次通过亲和力驱动的核酸接头与磁珠结合。第二个结合步骤允许使用水基洗涤溶液进行最终洗涤步骤,无需进行干燥,避免过度干燥可能带来的核酸质量的损害,并将...
核酸提取纯化主要应用场景及解决方案!
sbeadex试剂盒采用一种表面修饰过的超顺磁性磁颗粒,双层coated,其创新的磁珠两步结合机制(如下图,第一步结合:核酸先是通过极性相互作用和silica结合,然后加入洗液1,将蛋白等大分子杂质洗掉,再加入水基洗液2,将脂类糖酚类等洗掉同时进行第二步结合(核酸通过一种亲和性介质和DNA接头结合);然后可选择性使用加洗液3...
国家药监局器审中心|新冠核酸、抗体、抗原检测试剂注册审查指导原则
7.1如试验体外诊断试剂同时适用于快检机型和常规机型,且经临床前验证试验体外诊断试剂在快检机型与常规机型上的检测性能没有显著差异,但在样本提取纯化或反应体系等方面存在明显差异,导致检测时间上存在明显差异的,建议以代表性快检机型为主机型进行临床试验,同时进行一定数量的代表性快检机型与代表性常规机型之间的比较...
「法规」运动神经元存活基因1(SMN1)检测试剂注册证审查指导原则
本指导原则是对SMN1基因检测试剂的一般要求,申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用。若不适用,需具体阐述理由及相应的科学依据,并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。本指导原则是供注册申请人和技术审评人员使用的指导性文件,但不包括审评审批所涉及的行政事项,亦不作为法规强制执行,...
生物质粒的规模化发酵生产
待溶氧开始回升,初始投料速率设定为0.1mL/min,并每小时增加10%至20%(www.e993.com)2024年11月5日。发酵中后期将细菌比生长速率(μ)保持在0.03至0.15h-1。发酵过程增长曲线如下图所示。在培养过程结束时,P1质粒OD600峰值达到105.5,P2质粒OD600峰值达到107.78。用提取试剂盒提取发酵液质粒后用分光度法测得质粒的含量。P1质粒含量达到576mg/L...
国家药监局发文:新冠抗原试剂注册提高门槛!
应详细说明产品所采用的技术原理及检测流程。提供不同适用机型的检测通量,即一次检测最多可检测的样本数。提供核酸提取(手工和自动提取方式应分别明确)和PCR扩增的时间,以及检测全过程所需的时间。不同检测流程,分别提供最少和最多检测样本量下的检测时间。与已上市同类产品进行比较,比较内容包括样本类型,检测原理,...
质粒DNA提取及浓度纯度测定
异戊醇的作用是降低表面张力,可以减少抽提过程产生的泡沫,并使离心后水层、变性蛋白质层和有机层维持稳定。含有质粒DNA的上清液可用乙醇或异戊醇沉淀,获得质粒DNA。[仪器、材料与试剂](一)仪器和材料恒温培养箱、恒温摇床、台式离心机、高压灭菌锅、紫外可见分光光度计、移液枪、Eppendorf管、E.coliDH5α菌株...
植物中验证蛋白相互作用的Pull-down和Co-IP详细技术方案
Co-IP是以抗体与抗原之间的专一性作用为基础来研究蛋白质相互作用的经典方法,也是确定2种蛋白在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的蛋白互作得以保持,当蛋白粗提物与能够识别目的蛋白的琼脂糖凝胶交联的标签抗体珠子(agarose-conjugatedanti-TAG...
质粒提取实验:碱裂解法提取方案
主要试剂的作用原理氢氧化钠的作用:在碱裂解法中,氢氧化钠的作用原理是使细胞膜由脂双层结构向囊泡化转变,从而使细胞裂解,氢氧化钠的作用既能裂解细胞让细胞内含物释放出来,又是质粒DNA和染色体DNA得以分离的关键。但是对革兰氏阳性菌来说,提取质粒时不能直接使用碱裂解法,而是先用溶菌酶将肽聚糖层消化,然后才...