Cell丨拓宽对同源重组的理解—同源重组过程中同源搜索的主动机制

同源重组的关键步骤是损伤DNA必须与同源供体dsDNA配对,即同源搜索(homologysearch)1。同源搜索的重要特征是相关搜索中间体的瞬时性和高度动态性,为全面理解同源搜索带来挑战。目前同源搜索的原理包括3D的段间转移、短距离1D的扩散及长度相关的同源性识别的组合2,但这些机制只考虑了Rad51/RecA重组酶的基本特性,...

双酶切和同源重组法构建载体

同源重组法构建载体采用同源重组法构建载体与常规双酶切构建载体方法不同。首先,设计引物时上游引物5’端前面加的是酶切位点(如HindIII)及该酶切位点在pMIRreporter载体中对应前面的15个碱基载体片段,下游引物5’端前面加的是HindIII酶切位点及该酶切位点在pMIRreporter载体中对应后面的15个碱基载体片段,...

周斌:揭示细胞的命运,从哪里来?到哪里去?|2022药明康德生命化学...

接下来他继续发展了应用更为广泛的DeaLT,在不清楚是否有干细胞存在以及干细胞分子标记未知的情况下,利用双同源重组酶技术证明了成体心脏中心肌细胞来源于自我增殖,而非干细胞的分化(Circulation2018、2019)。▲周斌团队通过DeaLT-IR策略对c-Kit+非心肌细胞(ZsGreen+)进行谱系追踪的示意图该技术将Dre-rox同源重组系...

酵母表面展示与噬菌体展示在纳米抗体研发中大比拼

噬菌体展示文库采用酶切连接或者同源重组,其中酶切连接的方式大家最常用,相对于体外同源重组成本更低。体外同源重组可以大大提高连接效率,但成本非常高。酵母表面展示是将线性化的目的片段和线性化载体按一定比例电转化酵母感受态细胞,片段和载体会在酵母细胞内通过同源重组的方式环化为质粒,成本低廉,操作简单。展示效率...

《细胞》:肿瘤突变负荷飙升3倍,竟然还能逃脱免疫!事出反常必有...

▲机制总结图总的来说,这项研究发现KEAP1的缺失可导致EMSY不能被正常降解,进而导致肿瘤细胞的HRR缺陷并对PARP抑制剂敏感。此外,EMSY还可以抑制STING通路,进而导致肿瘤免疫逃逸的发生。因此,单独或联合靶向PARP和STING通路可能成为KEAP1突变的肺癌患者的一种治疗策略。

从经验到理论、从数据到网络——脑科学研究的四次范式转移

近年来在反向遗传学和同源重组基因编辑技术飞速发展下,人们对病毒示踪剂的运用更加灵活和广泛(www.e993.com)2024年11月11日。在疫苗株的基础上,改造病毒基因组,敲除特定毒力基因,插入荧光蛋白等外源基因,获得低毒力、安全、携带标示物的重组示踪工具病毒。图7.RV病毒跨单元突触示踪技术设计草图...

基因编辑:上帝的手术刀,将为我们带来怎样的技术与市场机遇?

基因编辑依赖于经过基因工程改造的核酸酶,也称“上帝的手术刀”,在基因组中特定位置产生位点特异性双链断裂(DSB),诱导生物体通过非同源末端连接(NHEJ)或同源重组(HR)来修复DSB,因为这个修复过程容易出错,从而导致靶向突变。1.2基因编辑的基本原理对于基因功能缺失的遗传病的治疗,最根本的办法是把出错的基因找出来并...

PARP抑制剂投资价值深度分析

图3:“合成致死”原理这是什么意思呢,如前文所说,人体内的DDR(DNADamageRepair)是非常精密的,当单链受损的时候,PARP酶作为断裂的分子传感器,参与单链修复(SSB),但是如果单链修复崩溃,则会引起双链修复(DSB)中的同源重组参与DNA修复,保证DNA修复功能。但是如果同源重组修复功能也失效,那么基因组就会过度受损...

m??A修饰介导的基因调控及其治疗意

此外,m6A修饰还参与了长链非编码RNA(lncRNA)的转录调节。RBM15/15B能与METTL3-WTAP甲基化复合物结合,并将其招募到lncRNAX-非活性特异性转录物(XIST)的特定位点,导致m6A在其相邻位点沉积,并通过招募YTHDC1促进XIST介导的基因抑制(图2E)。m6A修饰与同源重组修复...

PARP 抑制剂+免疫检查点抑制剂,1+1>2?

TOPACIO和MEDIOLA试验均显示了在晚期乳腺癌、卵巢癌中同源重组修复缺陷患者的潜在获益;同时也有研究表明去势抵抗性前列腺癌(CRPC)中同源重组修复缺陷患者可从奥拉帕利联合德瓦鲁单抗治疗中获益。为了使患者从联合治疗中获益最大化,我们必须使用有效的疗效预测生物标记物来优化患者选择,这可能需要基因组学和不同生物标...