Nature重磅综述 |关于RNA-seq,你想知道的都在这
近期OxfordNanopore展示他们的纳米孔测序技术能直接测序RNA,也就是说,建库过程中没有修复、cDNA合成、PCR扩增这些过程,移除了这些操作过程的偏好并且保留了RNA上的表观修饰信息,这一技术也称为dRNA-seq。直接从RNA建库需要两步接头连接。首先,带有oligo(dT)悬臂的duplexadaptor与mRNA的PolyA尾巴退火连接。后续是一个...
全面解析:PCR实验室改造从设计到实施的全方位要点
医院的PCR实验室装修可以设计为分散式或组合式布局,但无论采用哪种形式,通常都需要涵盖以下四个主要实验过程:试剂制备、样品处理、核酸扩增和产物分析。此外,根据实验需求,还可能增加样品破碎的过程。4、压力控制与污染防护在PCR实验中,防止核酸气溶胶扩散污染是至关重要的。为了控制实验室内部的气流,试剂制备和样品...
知识分享|一文了解实时荧光定量PCR(qPCR)技术的原理与分类
实时荧光定量PCR技术(RealtimequantitativePCR,qPCR)是在PCR反应体系中添加荧光报告基团和荧光淬灭基团,通过荧光信号来实现对核酸分子的定量检测过程。在反应过程中,PCR产物随着扩增反应的进行不断生成,荧光信号不断增加,进而可以通过荧光信号的变化对整个PCR过程进行实时监测,并通过标准曲线对原始模板进行定量分析。本...
今天,走进开封这里!看它们如何“现原形”!
根据扩增仪预设的程序,进行多轮循环扩增,每个循环通过升温和降温,使目的基因得到指数扩增。这一过程通常需要1-2小时。得到扩增曲线,工作人员将通过曲线的形状判读阴阳性或数值。在曲线和质控均无异常的情况下,方可报告样本结果。如遇到需要复查的情况,则重复上述加样、提取、扩增的过程,有时候甚至需要重新采样,出报告...
一份核酸检测报告是怎样诞生的?
Step8核酸扩增由于样本中所含病毒核酸的量少到不足以被检测,这就需要让核酸通过不断复制变多,这一过程被叫做核酸扩增。随着扩增程序运行,新冠核酸片段不断合成,发光基因发出荧光,就能被仪器探测到。检测过程中不能停下来添加新标本,必须等待这一批扩增完成,才能进行下一批的扩增,这也是标本不能随到随检的原...
细胞癌变的关键过程有了答案,这类蛋白决定了细胞命运
▲研究通过体内CRISPR筛选来监测小鼠皮肤的克隆扩增(图片来源:参考资料[1])结果,在很多重要的突变基因中,都高度富集了TNF信号转导的基因表达变化(www.e993.com)2024年10月23日。TNF是一类能直接造成肿瘤细胞死亡的细胞因子。在上皮细胞的克隆扩增过程中,TNF(更准确地说,是其中的TNF-α)由周围环境的巨噬细胞生产,它们促进了那些积累了癌症基因突...
Nature | 突破性癌症治疗:首个TIL实体瘤细胞疗法走向临床
优化生产流程:通过改进TIL细胞的提取、培养和扩增过程,提高生产效率,从而降低生产成本。扩大生产规模:随着技术的成熟和市场的扩大,通过规模经济降低单位治疗成本。合作与资助:与政府、非营利组织以及医疗保险公司合作,为患者提供资金支持,减轻患者负担。研究替代治疗方案:探索成本更低的TIL疗法变体或其他免疫疗法,为患...
细胞癌变的关键过程有了答案!最新《自然》:这类蛋白决定了细胞命运
对于这个肿瘤发生的根本性问题,科学家们已经有了一些发现。我们知道,癌症常常源自致癌突变的积累。根据肿瘤演化模型,当癌症基因中随机出现的突变在细胞中不断积累,细胞的控制程序会走向失控,细胞也开始不受控制地快速增殖。这个过程就是肿瘤发生的第一步——看似正常组织的克隆扩增(clonalexpansion)。
《食品科学》:东北农业大学张微副研究员等:CRISPR/Cas-等温扩增...
这一扩增过程可在30~42℃、30min以内的条件下高特异性地完成。唯一不同的是RPA与RAA酶的来源不同,RPA重组酶来源于T4噬菌体,而RAA重组酶来源于细菌或真菌。RAA采用的来源于细菌和真菌的DNA聚合酶和重组酶相较于RPA具有更高的活性。CRISPR/Cas生物传感系统已与RAA技术相结合,以检测各种食源性病原体,包括单...
核酸检测三步拿结果?记者实地探访核酸检测全过程
第八步:上机扩增将所有提取好了的核酸加入扩增反应液后放入扩增仪中,编好所有样本的标本编号,标明阳性阴性对照孔位置,选好相应程序就可以开始进行扩增程序了。这个过程大约需要2小时,而且仪器一旦启动扩增程序,是不能停下来中途添加新的标本的,必须等这一批扩增完成后才能进行下一批标本的扩增。