细胞原代培养——万融实验

(以下步骤均在超净台中进行)无菌取出脾脏,用针芯研磨使细胞通过200目细胞筛而进入适量无血清RPMI1640培养液中。1500r/min离心10分钟,弃上清,加入适量0.83%Tris-NH4Cl,室温放置5分钟,裂解红细胞后1500r/min离心10分钟,弃上清,加入无血清RPMI1640培养液洗涤细胞2次,每次1500r/min离心10分钟,弃上清,最后加入1～...

体内组织细胞的体外培养

心肌比较容易培养和生长,可用悬滴培养、组织块培养和消化培养法,均可获良好的效果。取心室肌培养较好,原代培养的鸡胚心肌呈纺锤形,培养成功时,一周后可见节律性收缩现象。五、巨噬细胞培养巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。

生产疫苗用的细胞,都有哪些?详解不同细胞基质与生产特点!

将新鲜动物组织剪碎、消化、分散后,在适当条件下进行培养的细胞称为原代细胞,它们不能进行多代次的长期无限的培养,经过一定代次培养后,该细胞再也不能生长繁殖,直到衰老死亡和凋亡。一般将动物组织消化培养的第一代细胞称为原代细胞,第二代细胞称为次代细胞,如此类推。1细胞类型根据不同动物组织来源,有地鼠肾...

【科学普及】肠道的守护神——肠道干细胞

在干细胞损伤期间,隐窝的细胞是高度动态的,来自不同谱系存活的非肠干细胞可以回到隐窝基底的位置,在那里它们可以恢复到表达Lgr5的干细胞状态。此时,新的干细胞开始快速增殖来补偿丢失的细胞数量,使得肠隐窝细胞数量发生短暂扩增以及随后产生隐窝裂变来重新填充肠道组织受损的部位。在肠干细胞分化命运的研究中,通过Dll1...

【文献阅读】鉴别细胞系对克里米亚-刚果出血热病毒的敏感性

利用经乳鼠扩增的CCHFV分别感染16种来源于肝、肾、脑、肺等器官的人源细胞系和6种哺乳动物细胞系,通过综合评估病毒感染后细胞培养上清中的病毒载量、感染细胞中病毒蛋白表达水平、细胞生长曲线、细胞病变效应等,对CCHFV的感染敏感性进行测试。发现来源于CCHFV主要靶器官的肝脏(肝癌细胞Huh7)、肾脏(人肾上腺皮质癌细胞SW...

匠者论道:心肌细胞分离那点事儿

钙离子:分离心肌细胞过程中无钙缓冲液的灌注是必不可少的一步,然而Zimmerman和Hulsmann发现,心脏离体后缓冲液中Ca2+从无到有的转换过程会导致部分心脏组织破裂,钙离子内流,使细胞出现明显的挛缩和细胞内酶的大量释放,组织高能磷酸盐耗尽,以及包括肌丝挛缩和线粒体肿胀在内的超微结构损伤(www.e993.com)2024年11月20日。引起这种损伤的机制可能是...

上世纪80年代中国流行性出血热大暴发往事

当时,国内的三种灭活疫苗采用的是原代细胞或脑组织作为基质的传统工艺,细胞杂质成份多,操作麻烦,抗体反应水平及阳转率相对较低,易引起接种副反应。杭长寿利用从美国细胞公司进口的传代细胞(Vero),研制出了副反应更少的传代细胞双价纯化灭活疫苗,2001年后有的进入临床观察,并最终批准,实现了老百姓“打一针不得病”的...

从Dengvaxia的兴衰看登革热疫苗的艰辛开发历程

接下来,每隔5-10天,在32℃时,血清型1,2,4病毒在原代狗肾细胞(PDK)上传代,而血清型3病毒通过绿猴肾细胞(GMK)上传代,最后在胎猕猴肺细胞(FRhL)上培养减毒,从而获得适用于疫苗的病毒株,即:DENV-1(16007)PDK13(编号16007血清型1在原代狗肾细胞传代13代)...

2015年版《中国药典》三部病毒类制品部分修定意见公布

(2)蛋白酶缓冲液成分中取消“5mol/L氯化钠溶液2.0ml”以避免样品处理过程中出现白色絮状沉淀;(2)点膜操作DNA固定增加紫外交联法;(4)检测方法中不规定采用酚-三氯甲烷抽提,生产也可采用其他方法或试剂进行抽提,无论采用何种方式进行抽提,检测Vero细胞DNA参考品至少应能够达到10pg的检测限。