分析qPCR 数据,竟被导师冤枉在实验室「炒股」

扩增曲线:qPCR过程中,以循环数为横坐标,以荧光强度为纵坐标,以反应过程中实时荧光信号所做的曲线。▲应为平滑的S型扩增曲线,阳性结果(科研)理想的CT值范围:1535;技术重复之间的CT差异<0.5。熔解曲线:指随温度升高DNA的双螺旋结构解链程度的曲线。分析该曲线可以用来确定不同的反应产物,包括...

揭开“内标”未出之谜

优化处理后的扩增曲线为PCR扩增仪对实时监测到荧光信号进行平滑处理、去除噪声和异常值等操作,通过对这些数据优化处理,可以使得扩增曲线更加平滑、清晰,更容易进行分析和解读,也是曲线美化的重要手段[3]。其中“噪音容限”设置可去除一些翘尾现象,但同时也会影响对基因检测的灵敏度,实际工作中需要根据检测选择适当的参数...

新冠内标扩增反应曲线呈锯齿状,原因是……

1.扩增曲线不光滑如图8。主要有两个原因:(1)扩增信号太弱,经系统矫正后,就会产生不平滑的线,可以通过提高模板浓度重复实验。(2)仪器本身的问题,可能在扩增过程中仪器出现波动或者检测孔本身出现异常。图8(图片来源于网络)2.扩增曲线呈锯齿状且不连续如图9。原因是典型的ROX添加不当导致的异常结果。图9(...

PCR异常扩增曲线案例分析与解决办法盘点!

基线不平滑,整体扩增信号杂乱,感觉整个扩增效果有点被抑制的情况。02分析:从整体来看整板扩增效果不是特别理想,然而进行样本单独分析时,发现问题仅出现在几个标本身上,这几个标本很多都是处于同一条八联管,抛开这几条有问题的八联管进行分析时其余结果未见异常曲线。03解决:受影响的标本进行复查,结果正常;...

货出不去、款回不来,外贸工厂受困国际物流

停工：“货出不去”收紧企业资金链对于货期没有那么紧张的企业而言，停工、减少订单则是他们的另一个选择。“太难了，有一个工厂是出口给美国客户的，从今年5月开始才做新订单，之前都在解决去年的订单，因为订不到柜子，现在每个月他都减少50%的订单。”9月6日中午，走访完制鞋厂的郭嘉坐下来就叹了一口气说...

伴随诊断行业研究:核心技术突破不断,伴随诊断迎高速发展期

应用荧光染料:SYBRgreen:在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步(www.e993.com)2024年11月5日。应用特异标记探针:TaqmanProbe:PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特...

微生物扩增子测序图表解读(实例数据)

4.2Shannon-Winner曲线Shannon-Wiener曲线,是利用shannon指数来进行绘制的,反映样品中微生物多样性的指数,利用各样品的测序量在不同测序深度时的微生物多样性指数构建曲线,以此反映各样本在不同测序数量时的微生物多样性。当曲线趋向平坦时,说明测序数据量足够大,可以反映样品中绝大多数的微生物物种信息。

qPCR 曲线「丑」到拿不出手!除了引物,这些问题也要注意

除了熔解曲线,RNA降解、扩增曲线杂乱、扩增无法到达平台期、复孔重复性差、CT值异常等问题也是层出不穷,但种种问题都不能一概而论,对症下药最重要。如果你也有以上qPCR实验问题,别慌!为了让大家少走弯路,11月15日19:00赛默飞联合丁香园开展qPCR专题直播课程,围绕「从入门到精通,qPCR疑难、技巧轻...

小小蓝莓带飞诺普信业绩,水果红利还能吃多久?

旺季大赚，淡季怎么办？诺普信是一家从事农药制剂等农业投入品和以蓝莓为主的生鲜消费品公司。为何诺普信业绩大增，股价却大跌，或与几大因素有关。首先，蓝莓业务的季节性十分明显，今年一季度产量占比大增。蓝莓淡季如何平滑业绩？生鲜消费类业务是诺普信的“第二增长曲线”，而蓝莓又定义为生鲜消费业务的“战略作物...

“重大科学仪器设备开发专项”2022年度申报指南征求意见(全文)

项目统一按指南二级标题(如1.1)的研究方向申报。同一指南方向下,原则上只支持1项,仅在申报项目评审结果相近、技术路线明显不同时,可同时支持2项,并建立动态调整机制,根据中期评估结果,再择优继续支持。除特殊说明外,所有项目均应整体申报,须覆盖全部研究内容和考核指标。项目执行期原则上为3～5年。一般...