你做质粒提取实验时,是否也遇到了这些常见问题?

在常规质粒提取试剂中,碱裂解法最为常用,但要注意其操作过程中,动作必须尽量温和,否则基因组DNA会由于剧烈操作而被破坏成小片段,在中和过程中被复性,保留在上清中随质粒DNA一同被回收,不仅会导致分光光度计测定的质粒DNA浓度值虚高、影响质粒提取的纯度,还会影响后续的转染效率。因此,质粒提取后进行琼脂糖凝胶电泳就...

疫苗前沿 | 重组戊型肝炎疫苗宿主细胞残余DNA荧光染色法检测方法...

由验证结果可知残余DNA含量线性R2均>0.99;准确性验证高中低浓度的加标回收率均在90.00%~110.00%范围内;重复性和中间精密度RSD均在<15.00%的可接受范围内,表明该方法线性良好、准确性和精密度高,可用于检测重组HepEV残余DNA的含量。荧光染色法同DNA探针法相比,不受工程菌种类限制,且简便、快速;与定量PCR法相比,其...

案列分享 | 液体活检应用“Crystal Digital PCR”高阶多重技术...

针对大规模样本检测:例如,在检测ESR1基因时,采用Ruby芯片,能够实现单次检测384个样本,提供高样本通量解决方案。针对多基因组合检测:单个样本检测,能够同时检测超过100种基因靶标,实现高效的多重基因检测。Fig.4CrystalDigitalPCR??两种检测策略2.3对低浓度、稀有突变有高灵敏检出(MAF0.05%)在常规条件下...

常凌乾、樊瑜波、王杨团队开发超低浓度ctDNA富集检测平台

此外,该装置检测到的早期患者血清中ctDNA的含量明显低于中晚期患者,证明该平台的定量判断能力可以预测患者的肿瘤发展(图3g和3h)。通过将分析物的提取和富集(FF-ICP)与进一步的生物分析技术进行无缝集成,为超低丰度生物标志物的检测带来巨大的好处。与传统检测技术相比,该平台的灵敏度显著提高了两个数量级,能够避免因...

我国科学家团队成功开发超低浓度ctDNA富集检测平台

通过将分析物的提取和富集(FF-ICP)与进一步的生物分析技术进行无缝集成,为超低丰度生物标志物的检测带来巨大的好处。与传统检测技术相比,该平台的灵敏度显著提高了两个数量级,能够避免因浓度不足导致的误诊风险,尤其有利于临床感染筛查或者早期肿瘤诊断。图3.用FF-ICP装置检测血清中ctDNA...

Nature重磅综述 |关于RNA-seq,你想知道的都在这

混样测序需要仔细测定每个RNA-seq文库的浓度,并假定混合的不同样品中cDNA的总量相差不大(低方差),因此读取的总reads数才能均匀地分到各个样品中(www.e993.com)2024年11月18日。在进行昂贵的多通道混合测序之前,运行单个lane确认样品之间cDNA总量相差不大是值得的预操作。选择测序参数:reads长度和单端或双端测序。

【沃信】咋用超声波细胞粉碎机(破碎仪)进行高质量RNA/DNA提取

样品应尽快放入液氮或-80℃冰箱中保存,以避免RNA/DNA的降解。避免反复冻融,以减少样品质量的损失。二、实验准备清洁工作仔细清洁实验平台、试剂盒、器皿和工具等,确保无RNase/DNase污染。使用经RNase/DNase清洗的试剂和器皿。选择合适的提取方法

指南共识丨纳米孔测序在病原微生物检测中的应用专家共识

(1)样本应根据实际送检情况选择合适的运输方式:若样本可在24h内送达实验室并开始检测,可考虑用冰袋低温运输;若运输时间在24～72h内,应使用干冰运输,送达实验室后应立即进行样本前处理和核酸提取,以防止核酸降解影响检测效果。运输过程中应尽量避免剧烈颠簸,以规避漏液导致的污染风险。若怀疑高致病性或新发突发传...

进化史上最幸运的8项基因突变

人类进化到现在就是由无数的有益突变促成的。突变是随机的,正常情况下突变频率很低,但在如放射性辐射、致癌化学制品等不利条件刺激下,突变频率会大大提升。有研究发现:对Y染色体的DNA序列分析透露,人类基因从上一代传递到下一代,每次会累积100到200个新的突变。这一数字是人类基因突变率的首次直接测量——它相...

“新房通风”要将窗户打开?难怪甲醛“难消散”,这招才能去甲醛

（知名品牌产品的质量相对稳定可靠、性能好）3.尽量选择一些天然提取物为主，不含磷和有机挥发物，同时pH偏中性的产品，这样对环境、皮肤的伤害都小一些，更能减少甲醛带来的伤害。（一般产品包装上会有宣称字样）4.注意产品的适用范围，选择对应合适的洗涤产品。（一般产品包装上会标注是否适用陶瓷、塑料、木...