干货分享:蛋白质融合表达的标签及切割研究汇总
通过这一"甘氨酸连接肽"只需较少酶量就可达到完全切割,而且也可以避免可能发生的错误切割.有效的消化缓冲液是纯的Tris缓冲液,pH8.0.在缓冲液中存在的NaCl具有抑制作用.凝血酶可从切割产物中用p-氨基琼脂糖亲和纯化,或者superose-12FPLC柱凝胶过滤或者苯甲脒琼脂糖移去。4Xa因子在标签和目标蛋白之间的Xa因子...
...吉林农业大学闵伟红教授等:谷氨酸棒状杆菌高丝氨酸脱氢酶单...
随后,增大浓度相对酶活力开始减弱;终浓度为20mmol/L的Mg2+对WT、A61L和G25G有激活作用,并且在该浓度下WT和突变体相对酶活力最高,随着浓度增加相对酶活力降低;WT和A61L在Ca2+终浓度为20mmol/L和60mmol/L时被激活,G25G在
...教授等:谷氨酰胺转氨酶催化交联对肌原纤维蛋白凝胶特性影响的...
1.2.1酶浓度和底物浓度在酶促反应中,酶浓度和底物的浓度是限制反应速率的最主要因素。研究发现,TGase添加量的增加使MP的G′值显著增大,其原因是当TGase添加量较低时,只有少部分MP分子能够产生交联,当TGase添加量充足时,MP分子之间才会充分交联。同时,杨明柳等研究发现SDS-PAGE图谱中MHC带随TGase添加量的增加...
...地理所刘远团队揭示基质可用性调和不同土壤剖面SOC矿化的温度...
PRI-8800全自动变温土壤温室气体在线测量系统为Q10的研究提供了强有力的工具,不仅能用于测量Q10对环境变量主控温度因子的响应,也能用于测量其对土壤含水量、酶促反应、有机底物、土壤生物及时空变异等的响应。PRI-8800为Q10对关联影响因子的研究,提供了一套快捷、高效、准确的整体解决方案。可设定恒温或变温培养模式...
...南阳师范学院唐存多副教授等:大肠杆菌L-苏氨酸脱氢酶的高效...
重组L-TDH的温度特性由图6可知,在温度为20~45℃范围内,酶促反应速率随温度的升高而不断提高,超过45℃后,反应速率逐渐下降,表明EcTDH的最适反应温度为45℃,在40~45℃之间时具有较高酶活力。如图7所示,在35℃和40℃保温120min后的残留酶活力仍然高于90%,这表明它在35~40℃范围内有较好的稳...
温度对酶促反应速度的影响
酶促反应在一定范围内(0~40℃)随温度的升高而加快(www.e993.com)2024年9月15日。但酶是蛋白质,故温度继续升高,酶逐渐变性失活,80℃以上时大多数酶已不可逆变性。温度低时,反应速度随温度升高而加快,当温度超过一定数值时,反应速度反而随温度上升而减慢,形成倒V形曲线(图4-7)。酶促反应最快时的环境温度称为酶促反应的最适温度。对大多...
关文强教授等:可溶态和膜结合态双孢蘑菇多酚氧化酶的分离纯化及酶
sPPO和mPPO对底物邻苯二酚的酶促动力学曲线结果如图4所示,从拟合的Michaelis-Menten函数得出,sPPO的Km为8.85mmol/L,Vmax为1196U/(mL·min),mPPO的Km为5.07mmol/L,Vmax为3120U/(mL·min)。由此可知,mPPO跟邻苯二酚结合能力更强,褐变反应速度更快。这些结果说明PPO与某一底物间的亲和力与催化活性可能与...
2020考研西综冲刺复习:“酶”型考点速记汇总(1)
(1)最适pH;(2)适宜温度;(3)足够的底物浓度。(1997)16.酶的Km值——对同一底物,不同的酶有不同的Km值。(2008)17.一个简单的酶促反应,当[S]18.心肌中富含的LDH同工酶是—LDH1。(2001)19.同工酶的概念——是催化相同化学反应,而酶的分子结构不同、理化性质可各异的一组酶。(1998)...
> 高考生物复习知识点:与酶有关的曲线
⑶过酸、过碱、高温都会使酶失活,而低温只是抑制酶的活性,酶分子结构未被破坏,温度升高可恢复活性。⑷反应溶液pH的变化不影响酶作用的最适温度。4、底物浓度和酶浓度对酶促反应的影响:⑴在其他条件适宜、酶量一定的条件下,酶促反应速率随底物浓度增加而加快,但当底物达到一定浓度后,受酶数量和酶活性限制,酶...
中科院丛志奇研究员课题组:利用双功能小分子产生P450过加氧酶
作者首先合成了一系列双功能小分子(图2),以P450BM3-F87A催化的苯乙烯环氧化作为模式反应,考察小分子的影响。结果显示:双功能小分子Im-C6-Phe存在下的环氧化反应TON提高30多倍,氧化苯乙烯生成速率提高近60倍,初步证明双功能小分子对H2O2的活化起了重要作用,同时还发现双功能小分子的链长是其发挥作用的一个...