CRISPR干预的CHO细胞系开发方法

研究人员报告了通过中断几个基因并去除宿主细胞蛋白(HCPs)来建立和工程化“清洁”CHO细胞的步骤。他们证明了有针对性的基因组编辑,协调组学研究,可能导致HCP含量显著降低。研究人员开发了基于系统生物学的计算机模型,以说明去除多个HCP可以释放大量能量,然后使用蛋白质组学在多重CRISPR-Cas9破坏多达14个编码蛋白的基因之前...

B细胞培养攻略

图3TI-1和TI-2抗原[2]:TI-1抗原能够与BCR及丝裂原受体结合,在没有T细胞辅助的情况下激活B细胞;TI-2抗原则通过交联多个BCR激活B细胞。举例:B细胞体外激活扩增实验步骤(1)基质细胞的准备10cm细胞培养皿预先接种表达CD40L的基质细胞,作为B细胞培养的滋养层细胞。(2)B细胞接种将B细胞接种至10cm...

无动物成分培养新时代!日本研究员用木质材料培养人类干细胞:增殖...

1987年,FDA批准首个通过动物细胞培养表达的重组蛋白药物—组织纤维蛋白溶酶原激活剂(t-PA),随后EPO(1989年)、Rituxan(1997年)、Remicade(1998年)、Herceptin(1998年)、Humira(2002年)等动物细胞培养生产的重磅药物陆续批准上市,强劲的需求带动培养基加速更新迭代,实现更高的细胞密度和蛋白抗体表达水平。1997年Gibco推出...

论疫苗工艺的十年飞跃

MVA-BN在悬浮于无血清培养基中的原代CEF细胞中生长,随后通过包括苯并酶消化在内的多个切向流过滤(TFF)步骤进行收获、纯化和浓缩。为增加疫苗供应,FDA于2022年8月发布了JYNNEOS??的紧急使用授权(EUA),允许向18岁以下个人皮下(s.c.)给药(0.5毫升)和向18岁及以上个人皮内(i.d.)给药(0.1毫...

探究细胞里的“清洁工”,诺奖得主大隅良典自述如何开启自噬研究

由于我们对参与自噬的基因和蛋白质一无所知,因此第一步是分离出自噬缺陷突变体。但是当时,我们监测自噬的唯一方法就是观察液泡内自噬体的积累。我第一位硕士生塚田美纪(MikiTsukada)在我们工作的这个阶段发挥了核心作用。她取出了数千个诱变细胞,分别使它们处于饥饿状态,然后检查液泡内是否存在缺少自噬体的突变体。

...氧化三甲胺介导的ROS/TXNIP/NLRP3信号通路诱导血管内皮细胞焦亡

为进一步探讨茱萸丸防治AS的作用机制,本研究以TMAO介导的ROS/TXNIP/NLRP3信号通路为切入点,探讨其减轻内皮细胞损伤的机制,为临床治疗AS提供新思路(www.e993.com)2024年11月15日。1材料1.1动物SPF级雄性C57BL/6J小鼠13只,同品系的低密度脂蛋白受体敲除(lowdensitylipoproteinreceptorknockout,LDLR??/??)小鼠53...

【关注】万字长文!一文了解合成生物学

②构建:在生物系统中对目标基因进行操作,构建细胞工厂,该过程包括DNA合成,大片段组装以及基因编辑;相关技术:DNA合成、DNA拼接和组装、基因编辑、基因测序。③测试:由于逻辑线路及模块化的代谢途径在通过理性或非理性设计后,都会存在大量的突变体或候选目标,因此通常需要高效、准确和经济的检测,生成相应数据,评估构建的...

...苷对慢性阻塞性肺疾病模型小鼠肺泡巨噬细胞胞葬及吞噬功能的影响

2.13巨噬细胞吞噬及骨架结构变化观察各组小鼠肺泡巨噬细胞种板同“2.8”项,贴壁后吸掉培养液,加入大肠杆菌混悬液,使其终质量浓度为0.1mg/mL,吞噬3h后处理细胞:37℃预热的PBS清洗细胞2次;4%多聚甲醛固定10min;室温下PBS清洗细胞2次,每次10min;加入2mL0.5%TritonX-100溶液透...

科教兴国专题——历史情况

应该对草场资源进行全面考察和定点观测。对各主要牧区草场资源的分布、类型、牧草质量、载畜量以及冬、夏季牧场的关系等进行调查研究,编制全国及重点地区草场资源图。应该研究各主要地区草场合理利用的条件,调查缺水草场的地下水资源及其开发条件。4.热带与亚热带地区山地和丘陵的调查研究。我国热带及南亚热带地区,总...

灵魂追问:胶原蛋白究竟有没有未来?

1)这些片段被皮肤细胞摄入后分解成为合成胶原蛋白的氨基酸原料;2)这些片段可以与皮肤细胞的作用位点结合,在信号通路发挥作用。2、从大往小做陈家悦认为像这样“从大往小”做其实是医学界非常重要的方向。蛋白质有一个概念叫结构域,就是一个蛋白往往参与不止一个生物学过程。人类基因一共也就编码三万多种蛋白质...