徒手从液氮里捞细胞、弄坏价值百万的显微镜...实验室新人闯大祸了...
1.按照上述PBS的配方配制1XPBS。2.向1000毫升PBS溶液中加入1毫升Tween20。3.轻轻搅拌,使Tween20完全溶解。3、TBS(TrisBufferedSaline)用途:细胞培养和洗涤、免疫组织化学染色等。浓度:1XTBS体积:1升配方:-Tris(Trizmabase):6.05g-NaCl:8.77g-加...
解析R848结合流感疫苗的偶联剂依赖效应:对APC激活及体内免疫原性...
7.SDS-PAGE和免疫印迹分析第6天在48孔板中过夜培养人MODC细胞;第7天刺激细胞45、90、135或180分钟。用含有蛋白酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解细胞,使用BCA蛋白分析试剂盒评估蛋白质浓度,用凝胶电泳法分离蛋白质样品,将蛋白质转移到PVDF膜上,在4℃下与药物一起孵育过夜。洗涤膜与抗体结合,使用ECLWesternblotting底...
SDS-PAGE电泳及Western试剂配制protocol
5mgDAB;200ul1MTris(PH=8.5,常用作纯化液母液);9.5ml水,静置5min(加入Tris缓冲液会变浑浊),加入3.5ul双氧水,现用现配,可配好无双氧水的10X母液分装,-20℃保存,1ml/支,用时稀释到10ml并加入3.5ul双氧水即可使用。本实验室SDS-PAGE电泳凝胶配方如下:...
Tricine SDS-PAGE实用方案
1.用Bio-Radmini电泳装置进行电泳.30V电泳1hr,100V至电泳结束2.固定,染色及脱色:小分子量肽类在SDS-PAGE胶中容易扩散,因此电泳结束后,有时需要固定20min(固定液:0.5%戊二醛,30%乙醇),再进行染色20-30min(染色液:50%甲醇,10%乙醇,0.2%G-250),在脱色液(45%甲醇,...
凝胶电泳实验操作中的小技巧
方法改进:借鉴Tricine-SDS-PAGE中添加甘油或者尿素来提高分辨率的成功经验,在普通的SDS-PAGE中加入约13%的甘油,同样可以提高分辨率,有效防止小分子量蛋白的弥散.只要把原来配方中的水换成60%的甘油,就可以了.结果:加入甘油之后,条带较细,分得更开....
生物实验常用溶液的配制|乙醇|ml|缓冲液|培养基|蒸馏水_网易订阅
200~250mmol/LGlycine(电泳级)(pH8.3)0.1%w/vSDS可以配成5×贮存液,在900ml去离子水中溶解15.1gTris碱和94g甘氨酸,然后加入50ml10%(m/v)电泳级SDS的贮存液,用去离子水补至1000ml即可(www.e993.com)2024年10月21日。3、分离胶配方:H2O10.5,1.5MTris-HClpH8.87.5,20%w/vSDS0.15,30%丙烯酰胺/0.8%亚...
植物中验证蛋白相互作用的Pull-down和Co-IP详细技术方案
(23)如用于检测,在Sepharose中加入15-20??L1×SDS蛋白上样缓冲液,沸水煮3分钟,15000×g离心1分钟,取上清做SDS-PAGE电泳;(24)如用于Pull-down检测,继续后续操作。5.1.4GST体外蛋白质结合分析(GSTPull-down)(25)将结合有GST融合蛋白的GlutathioneSepharose4B悬浮在500??LNET...
抗体检测蛋白:Western实验操作步骤
2.电泳(Electrophoresis)(1)SDS-PAGE凝胶配制SDS-PAGE凝胶可以使用凝胶配制试剂盒进行配制,试剂盒提供了除水和配胶器具外的所有试剂以及配制各种浓度SDS-PAGE的配方。(2)样品处理在收集的蛋白样品中加入适量浓缩的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。例如2X或5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。使用5X的SDS-PAGE蛋白上样...