猫麻疹病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立
将合成在Puc-GW-Amp载体上的目的基因,连接到pMD19t-FeMV-L进行PCR鉴定,结果显示扩增出310bp的目的条带,与预期相符。进一步测序结果显示扩增片段与目的片段一致,表明重组质粒标准品pMD19t-FeMV-L正确构建。测定浓度100ng/μL,根据公式换算成拷贝数3x1010拷贝/μL。2.2荧光定量PCR反应条件的优化和标准曲线的建立...
上新(可试用) | 样本太多?定量实验太繁琐?全新一步法RT-qPCR试剂...
在体系中分别投入4、40、400pg的全U、全T模板,进行RT-qPCR实验,并以E=(1-2-??CT(全U-全T))%为公式计算Q226的防污染效果。图3可看出,无论是4、40、400ng模板投入量下,Q226的防污染效率均高于99%。图3.Q226的扩增效果图含gDNA清除模块,结果可靠RNA中的残留的基因组DNA(gDNA),可能会导致PCR...
冯卫东:1%的差异,10倍的差距
品牌战略等于定位乘以配称,可以用一个公式来表达:品牌战略=定位×配称。拿小米举例,小米刚刚崛起的时候,很多定位圈的大咖都认为它违反了定位理论的品牌延伸,注定失败。随着小米越来越成功,很多理论家又改口说小米的成功符合定位理论,因为它占据了高性价比特性。然而,特性不能脱离品类而存在,小米没有聚焦于某个品类,说...
qPCR 数据怎么算?一个万能公式带你搞定
一个万能公式带你搞定点此领免费科研入门教学资源qPCR的实验变量较多,操作复杂,尤其最后一步相对定量分析数值计算,可能会花费很多精力,最常用的相对定量方法是2^-△△Ct法。本文梳理qPCR数据计算经验,供大家参考!「qPCR影响Ct值」的关键因素模板浓度:模板浓度是决定Ct的最主要因素。控制在一个...
微生物扩增子测序图表解读(实例数据)
其中曲线的最高点也就是该样本的Shannon指数,指数越高表明样品的物种多样性越高。好奇的同学又有疑问,Shannon指数怎么算的?这里有Shannon指数的公式:其中,Sobs=实际测量出的OTU数目;ni=含有i条序列的OTU数目;N=所有的序列数。4.3Rank-Abundance曲线...
数字化等温扩增技术,Digital LAMP解析
经过扩增之后,有一个核酸分子模板的反应器就会给出荧光信号,没有模板的反应器就没有荧光信号,通过计算荧光信号的比例和泊松公式计算出核酸分子的绝对数量(www.e993.com)2024年10月23日。文章另一个特点是使用一种叫做自数字化的微流控技术(self-digitizationchip),这种技术常见于细胞捕获(如循环肿瘤细胞的捕获和分析)和化学合成中。根据文章报道...
那么问题来了,qPCR又是什么?
此公式用于计算待测样本与对照样本之间目的基因表达量的倍数变化,若F值=a(a>1),则代表待测样本相对于对照样本表达量上调a倍;反之若F值=b(1>b>0),则代表待测样本相对于对照样本表达量下调1/b倍。注:2-△△CT法需保证目的基因和内参基因的扩增效率基本一致才能使用。可通过查看扩增曲线中指数增长期是否平行...
干货| CT值大原因速查,qPCR 实验优化三步走
引物扩增效率的计算将基因扩增产物进行梯度稀释(至少三个梯度)同时进行qPCR,得到的CT值仪器会自动拟合标准曲线,或将CT值导入Excel中手动绘制标准曲线,将标准曲线中的斜率带入引物扩增效率的计算公式:e=10[??1/k]-1(e:扩增效率,k:斜率)...
万字精华:2023年企业私域要关注的10个重点(上)
当前环境下,很多企业都在融合资源,寻求第二增长曲线,或是借用数字化的工具实现经营的存量扩增,或者是建立起个人的第二收入曲线。进入2023,企业私域有什么新走向?本篇文章会从10个方面,来对企业的公私域经营涉及到的各个方面进行讲述,由于篇幅较大,会分为上下两篇发送。
中华人民共和国农业农村部公告第253号
9.2.3.1阴性:无Tt值,且无特征性扩增曲线,表明样品为阴性。9.2.3.2阳性:Tt值≤45,且出现典型的扩增曲线,表示样品为阳性。9.2.3.3Tt值>45,且出现典型的扩增曲线的样品建议复验,复验仍出现上述结果的,判为阳性,否则判为阴性。9.2.3.4出现Tt值但无特征性扩增曲线的样品,判定为阴性。