你做质粒提取实验时,是否也遇到了这些常见问题?

高拷贝数的载体常有2-3倍的产量波动(每毫升培养过夜的菌液产量为3-16μg);长片段质粒和表达型载体常以中低拷贝数为主,每毫升菌液的产量约为0.5-2μg;低拷贝质粒可以增加起始菌液量来提高浓度;l菌体中无质粒:有些质粒本身不能在某些菌种中稳定存在,经多次转接后有可能造成质粒丢失。5、如何提高质粒提取...

疫苗前沿 | 重组戊型肝炎疫苗宿主细胞残余DNA荧光染色法检测方法...

由验证结果可知残余DNA含量线性R2均>0.99;准确性验证高中低浓度的加标回收率均在90.00%~110.00%范围内;重复性和中间精密度RSD均在<15.00%的可接受范围内,表明该方法线性良好、准确性和精密度高,可用于检测重组HepEV残余DNA的含量。荧光染色法同DNA探针法相比,不受工程菌种类限制,且简便、快速;与定量PCR法相比,其...

惊天复活术!10 年老样本这么做照样提 RNA、DNA

同时,化学修饰的DNA不能在纯化过程中高效回收,而且在PCR或其他酶学分析中可能表现不佳。四、质量控制纯度要求:提取的核酸必须达到一定的纯度,以满足后续实验的要求。然而,FFPE样本中的杂质较多,如石蜡、蛋白质等,这些都可能干扰核酸的提取和纯化过程。浓度要求:提取的核酸浓度必须适中,过高或过低的浓度都可...

常凌乾、樊瑜波、王杨团队开发超低浓度ctDNA富集检测平台

结果表明,微平台的灵敏度显著高于传统PCR技术,达到了100%,能够大大避免了因ctDNA浓度不足而造成误诊的风险(图3e和3f)。此外,该装置检测到的早期患者血清中ctDNA的含量明显低于中晚期患者,证明该平台的定量判断能力可以预测患者的肿瘤发展(图3g和3h)。通过将分析物的提取和富集(FF-ICP)与进一步的生物分析技术进行无...

案列分享 | 液体活检应用“Crystal Digital PCR”高阶多重技术...

2.3对低浓度、稀有突变有高灵敏检出(MAF0.05%)在常规条件下,液体活检样本的浓度通常为0.5至3ng/ul。测试样本浓度分别为0.4ng/ul、0.8ng/ul和1.75ng/ul,对应的最小等位基因频率(MAF)覆盖了从0%到2%,包括0.05%、0.1%、0.5%、1%等关键点。无论样本浓度如何,都能够实现至少0.05%最小等位基因频率(MAF)高灵...

为何做无创DNA会出现胎儿浓度过低的情况?

如果胎儿浓度过低,会影响DNA检测的结果,可能会出现无法检测出来的情况(www.e993.com)2024年11月18日。往往出现这种情况一般会建议过1周后再进行二次的检测,如还是出现胎儿浓度不足,需要听取医生的建议再进行下一步的检查。如果检测结果显示胎儿DNA浓度过高,说明胎儿存在染色体异常的情况,但这并不能说明胎儿本身就存在问题,需要进一步的确诊。

我国科学家团队成功开发超低浓度ctDNA富集检测平台

结果表明,微平台的灵敏度显著高于传统PCR技术,达到了100%,能够大大避免了因ctDNA浓度不足而造成误诊的风险(图3e和3f)。此外,该装置检测到的早期患者血清中ctDNA的含量明显低于中晚期患者,证明该平台的定量判断能力可以预测患者的肿瘤发展(图3g和3h)。通过将分析物的提取和富集(FF-ICP)与进一步的生物分析技术进行...

简单困难样本全覆盖提取真菌DNA 搭配高通量解决方案高产高效

适用广泛、场景灵活、过程安全的特点，既可支持手动提取，也可高效地与液体工作站或全自动核酸提取仪配套使用，能在短时间内完成对大量样品的提取，以进行快速、大样本量的提取，提升整体效率。特别适合于同时处理大量样本及基础条件一般的实验室使用，提取DNA的产量高、完整性好，浓度可达100~300ng/μl。1...

为度创新突破|磁珠法血液基因组DNA提取试剂盒实现技术革新

结论：与对照试剂相比，为度试剂提3个样本的基因组DNA浓度均高于竞品试剂（Quibt检测结果）且DNA占比100%。2.体积灵活，满足大小体积样本提取注：洗脱液体积为100μL结论：在50-300μL体积范围内，使用相同的提取试剂体积和操作流程，血液样本体积与基因组DNA成线性关系，且OD260/280值在1.8左右，OD260/230>...

HIV-1感染机制新发现!mBio:衣壳蛋白协助DNA整合

Miller等人通过凝胶过滤层析分析发现,在低盐条件下(150mMKCl)分离的HIV-1胞浆PIC保持完全整合活性,而在高盐条件下(600mMKCl)活性丧失。他们发现在150mMKCl中分离的PIC中检测到少量的CA,而在600mMKCl中没有检测到。因此,推测CA与PIC松散相关,在病毒DNA整合中可能不起重要作用。Fassati和Goff从HeLa...