你做质粒提取实验时,是否也遇到了这些常见问题?
高拷贝数的载体常有2-3倍的产量波动(每毫升培养过夜的菌液产量为3-16μg);长片段质粒和表达型载体常以中低拷贝数为主,每毫升菌液的产量约为0.5-2μg;低拷贝质粒可以增加起始菌液量来提高浓度;l菌体中无质粒:有些质粒本身不能在某些菌种中稳定存在,经多次转接后有可能造成质粒丢失。5、如何提高质粒提取...
疫苗前沿 | 重组戊型肝炎疫苗宿主细胞残余DNA荧光染色法检测方法...
由验证结果可知残余DNA含量线性R2均>0.99;准确性验证高中低浓度的加标回收率均在90.00%~110.00%范围内;重复性和中间精密度RSD均在<15.00%的可接受范围内,表明该方法线性良好、准确性和精密度高,可用于检测重组HepEV残余DNA的含量。荧光染色法同DNA探针法相比,不受工程菌种类限制,且简便、快速;与定量PCR法相比,其...
案列分享 | 液体活检应用“Crystal Digital PCR”高阶多重技术...
Fig.4CrystalDigitalPCR??两种检测策略2.3对低浓度、稀有突变有高灵敏检出(MAF0.05%)在常规条件下,液体活检样本的浓度通常为0.5至3ng/ul。测试样本浓度分别为0.4ng/ul、0.8ng/ul和1.75ng/ul,对应的最小等位基因频率(MAF)覆盖了从0%到2%,包括0.05%、0.1%、0.5%、1%等关键点。无论样本浓度如何,都...
常凌乾、樊瑜波、王杨团队开发超低浓度ctDNA富集检测平台
结果表明,微平台的灵敏度显著高于传统PCR技术,达到了100%,能够大大避免了因ctDNA浓度不足而造成误诊的风险(图3e和3f)。此外,该装置检测到的早期患者血清中ctDNA的含量明显低于中晚期患者,证明该平台的定量判断能力可以预测患者的肿瘤发展(图3g和3h)。通过将分析物的提取和富集(FF-ICP)与进一步的生物分析技术进行无...
我国科学家团队成功开发超低浓度ctDNA富集检测平台
结果表明,微平台的灵敏度显著高于传统PCR技术,达到了100%,能够大大避免了因ctDNA浓度不足而造成误诊的风险(图3e和3f)。此外,该装置检测到的早期患者血清中ctDNA的含量明显低于中晚期患者,证明该平台的定量判断能力可以预测患者的肿瘤发展(图3g和3h)。通过将分析物的提取和富集(FF-ICP)与进一步的生物分析技术进行...
中国科大在基因转录调控研究中取得突破性进展
通过对原有ChIP实验方法进行改进和优化,克服了两个转录因子秀丽线虫中表达量小、表达时间窗口短、表达的D型神经元细胞占秀丽线虫细胞比例少(约占2%)等瓶颈,成功地完成了ChIP实验,拿到了可供高通量测序(ChIP-seq)的DNA样品(www.e993.com)2024年11月18日。这也是第一次实现了在多细胞动物中原位表达水平转录因子的ChIP-seq实验。转录因子是调控细胞...
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在1:200,800浓度时,对新生隐球菌有非常明显的抑制作用。它在体外与制霉菌素、放线菌酮及二性霉素乙对新生隐球菌和白色念珠菌的抑制浓度对比如表18所示:应用微量稀释法,得到了大蒜提取物在体外,60株深部真菌的5%最小抑制浓度(MIC)、90%最小抑制浓度(MIC)、50%最小杀真菌浓度(MFC)和90%最小杀真菌浓度(MFC)...
这位潮州人是无创产检奠基人、DNA癌症早筛,是下一个离诺奖最近的...
卢煜明迫切地想试试，但传统实验的第一步往往就是把血浆丢掉，因此他根本不知道该怎么提取血浆中的DNA，再加上刚刚回到香港，手上一没资金、二没资源，又能做什么呢？那一刻，在英国煮泡面的经历突然给他提供了灵感。“我的‘中国胃’不太喜欢英国的食物。每当我受够了，就会回宿舍煮泡面。我想，能不能像煮...
尼龙绳切成2000份,700次DNA检验揪出26年前凶犯
“DNA虽看不到、摸不着，但经过提取，加入试剂、大量复制基因片段，实现扩增，就可以达到机器能够检测到的浓度。”毕建红说，这项工作细致、重复、繁琐，而且面对浩如烟海的数据，她必须练就一双“火眼金睛”，因为枯燥的数据背后很可能是侦破一起大要案的关键。DNA检验技术人员正在工作警方供图在毕建红的记忆深处...
上新| 5 min细胞 or 10 min组织RNA提取,简单&疑难样本全覆盖(文末...
可兼容低至96孔板单孔及1x104个细胞的RNA提取。图2.不同产品RNA产量和完整度比对结果使用Vazyme#RC102与市场上同类产品SupplierA、B、C、D,按照各自说明书同时提取3×106个293细胞、1×106个BV2细胞,2×106个PBMC细胞和96孔板单孔Hela细胞总RNA,进行浓度测定和琼脂糖凝胶电泳检测。Vazyme#RC102提取的...