...棘孢木霉天冬氨酸蛋白酶基因的克隆表达及其对大豆分离蛋白的水解

2重组表达载体的构建和毕赤酵母工程菌株的筛选将线性化的重组表达载体pICH/asp电转至毕赤酵母GS115后,电转菌悬液涂布在MD平板上,28℃培养72h后,从中挑取单菌落至含1%脱脂奶粉的MM培养基上,以单菌落周围产生透明水解圈为筛选标志(图4),挑取具有最大水解圈直径的转化子进行酵母基因组PCR鉴定。由图5可知,以...

肾上腺脑白质?营养不良蛋白?慢病毒载体的构建和表达

选择ABCD1基因的H283R和P534R两个突变,首先采用方法,进行突变致病性及突变体结构稳定性预测;再利用分子克隆技术,将ABCD1基因克隆到pLEX-MCS慢病毒载体,构建野生型慢病毒载体:pLEX-ABCD1,定点诱变构建2个突变型重组载体:pLEX-ABCD1-H283R和pLEXABCD1-P534R,并与其他包装载体共转染293T细胞包装病毒。收集病毒并感...

质粒及细胞系构建定制服务

(1)诱导基因的定点突变;(单碱基突变,多碱基突变)(2)构建基因截短体质粒;图3:Stat3-fulllength和Stat3-deleteCoiled-coileddomain截短体(红框为缺失序列)示意图(1)亚克隆质粒构建;图4:将人源化FOXO1从pFlag-CMV4载体(a)中亚克隆至DOX诱导表达的PLVX-Tetone载体(b)(5)通过慢病毒介导的基因过表达;...

百普赛斯2023年年度董事会经营评述

在技术创新方面,公司在中国和美国设有研发中心,紧跟国际技术前沿,通过持续的技术和生产工艺创新,开发了膜蛋白表达纯化技术、基于数据分析的困难蛋白优化表达技术、生物素和荧光素蛋白标记平台技术、哺乳动物细胞可诱导表达技术、基因定点整合技术、化学界定细胞培养基及补料技术等多项核心技术,涵盖了重组蛋白研发、生产的各...

《食品科学》:四川农业大学刘书亮教授等:丝状真菌降解拟除虫菊酯...

在进行酶功能验证中最常规的方式就是克隆得到目的基因,构建表达载体以获得重组蛋白来检测酶活力,对酶的性质和功能进行研究。表达系统主要可分为原核表达系统和真核表达系统。表4列出了不同类型的异源表达系统、常用宿主细胞及表达的优缺点。原核表达系统宿主主要包括大肠杆菌和枯草芽孢杆菌,真核表达系统宿主主要包括酿酒酵...

2024年海南省自然科学基金立项项目公布—新闻—科学网

202324QN202槟榔黄化相关病毒APV1侵染性克隆和病毒表达载体构建及其应用研究海南大学赵瑞白2024-03-01至2027-02-286203324QN203基于15N示踪不同氮肥水平对土传枯萎病原菌的根际入侵效应研究海南大学范平珊2024-03-01至2027-02-286204324QN204甘蓝型油菜L3高油酸低亚麻酸性状的遗传解析及育...

激光雷达巨头速腾聚创冲刺港股IPO成功,估值近200亿港元丨投融资

艾名医学致力于肿瘤类器官技术和产品的研发,独创的MasterAimTM技术体系能实现对常见高发肿瘤类器官的高效构建,通过自研的无创实时类器官成像与分析设备OSCAR获得类器官生长及药敏数据,为肿瘤患者精准临床用药服务的同时也能为制药企业、医疗器械公司、研究机构提供体外药物评估模型构建或科研服务,降低临床风险及成本,加速...

前纳豆激酶原基因化学诱导型表达载体的构建及鉴定

摘要:目的克隆前纳豆激酶原基因,实现其在大肠杆菌中的表达,并对其表达条件进行研究。方法从枯草芽孢杆菌中分离纯化基因组DNA作为模板,通过PCR扩增前纳豆激酶原基因,将其克隆到质粒pUC19中,构建重组克隆质粒pNK并转化大肠杆菌DH5α;将目的基因片段与表达载体pET30a连接,构建重组表达质粒pENK,转化大肠杆菌BL21(DE3),对其...

运动发酵单胞菌基因表达严谨调控系统的构建

??设计T7RNA聚合酶表达质粒并构建转化菌株。图3.Ptet-AraC-PBAD-T7P基因线路模块示意图??检验双质粒系统蛋白表达效果。我们选用绿色荧光蛋白GFP作为报告蛋白,相应的基因克隆到含有PT7启动子的pTZ22b和pTZ28a空载体上;同时将该基因克隆到不含PT7启动子的pEZ15A空载体上作为对照组。将含上述报告基因的3...

...放线菌大片段DNA方法,获得抗癌活性新化合物,计划批量克隆基因簇

该方法较为简单、快捷且成本也相对低廉。谭高翼表示,华东理工大学生工学院源起于国内最早的抗生素制造工学专业,在微生物药物的发酵和制造方面有着深厚的底蕴,团队的下一步计划是利用CAT-FISHING技术批量克隆基因簇,目标是构建出天然产物基因簇实体元件库,助力微生物天然产物药物的研发。