知识分享|一文了解实时荧光定量PCR(qPCR)技术的原理与分类

3.定量分析原理在反应体系中,若设计一定的荧光阈值,起始模板量越大,其达到荧光阈值所需的循环数越小,则Ct值越小。在实验过程中,利用已知起始拷贝数的标准样品绘制标准曲线,由于待测样本PCR扩增产物数量与荧光基团发出的荧光强度呈对应关系,只要通过qPCR得到待测样本的Ct值,即可通过标准曲线计算待测样本的起始拷贝...

非洲猪瘟PCR检测仪的原理与应用介绍

PCR是一种用于扩增特定DNA序列的技术。其基本原理包括以下步骤:1.**样本准备**:从猪只样本中提取DNA,包括血液、组织样本等。提取后的DNA中可能包含非洲猪瘟病毒(ASFV)的基因组DNA。2.**引物设计**:为特定的ASFV基因序列设计一对引物。引物是短的DNA序列,能与目标DNA序列特异性配对。3.**扩增反应**:...

程伟教授:分子诊断技术新原理新方法及临床应用研究(二)

该研究通过互补碱基配对原理,将DNA-血红素链(A链)、G4-血红素链(B链)和引导模板(C链)混合并退火,形成完整的CEAS结构。通过优化不同链的比例和血红素间隔基的数量,以及不同的组装模式,研究团队确定了最佳的CEAS组装条件。CEAS的核心在于通过DNA模板有序引导G4-血红素DNA酶紧密结合到DNA-血红素上,从而关闭催化能...

常用PCR技术及原理

巢式PCR的实验原理为根据DNA模板序列设计两对引物,利用第一对引物(称为外引物)对靶DNA进行15-30个循环的标准扩增;第一轮扩增结束后将一小部分起始扩增产物稀释100-1000倍加入到第二轮扩增体系中作为模板,利用第二对引物(称为内引物或巢式引物,结合在第一轮PCR产物的内部,进行15-30个循环的扩增,第二轮PCR的扩增...

超多重 qPCR 新突破,阅尔基因创新技术在 Nucleic Acids Research...

其核心原理是:为每个靶标设计多个扩增子,在不同荧光通道的扩增曲线之间引入可编程的Ct值延迟,进而根据荧光出现顺序识别不同靶标(图1)。比如2个荧光通道(G和R)最多可以鉴别4个靶标。荧光通道数(F)和可控Ct延迟数(T)决定了CCMA的多重性:可控的Ct延迟是CCMA工作的基础,这一特性是通过抑制探针置换扩增(BDA...

指南共识丨纳米孔测序在病原微生物检测中的应用专家共识

2.1纳米孔测序的原理纳米孔测序是将单分子检测和电流信号传导相结合的测序方法,测序原理上摆脱了NGS的洗脱和PCR扩增(边合成边测序)过程,通过连接接头的马达蛋白将双链核酸解开,在电场力的驱动下使单链核酸分子穿过纳米蛋白孔道,由于不同的碱基通过纳米孔道时会产生不同阻断程度的电流信号,测序仪通过记录电流信号的...

人才强校 | 动物医学院陈耀星教授团队在分子生物学可视化技术方面...

已报道的恒温扩增方法一般需要两对引物才能在半小时内完成扩增,论文对引物进行了重新设计,通过在上下游引物5’端增加特定接头的方式,扩增产物可以持续延伸,并加速扩增反应。此扩增方式只需要一对引物,降低了引物设计难度,降低了恒温扩增技术的学习成本。操作流程与反应原理...

最高人民法院知识产权法庭裁判要旨摘要(2023)

21.生物电子等排原理在创造性判断中的应用案号(2021)最高法知行终846号裁判要旨判断药物化合物中两个基团之间的替换是否属于本领域公知常识,通常可以考虑生物电子等排原理。但对于非经典生物电子等排体而言,本领域技术人员是否会进行特定的基团替换,通常需要能够证明该类药物构效关系的现有技术作为证据支持...

学术大爆发!中国/华人学者一天发表35篇Nature Communications|...

8清华大学孙前文团队在NatureCommunications在线发表题为“PrimasepromotesthecompetitionbetweentranscriptionandreplicationonthesametemplatestrandresultinginDNAdamage”的研究论文,该研究发现引物酶促进同一模板链上转录和复制之间的竞争,导致DNA损伤。

Nature | 开辟治疗之路:反义寡核苷酸在蒂莫西综合征治疗中的突破

原理结合特异性:ASOs是设计来与特定的mRNA序列互补的短链核苷酸。当ASOs与其目标mRNA结合时,它们通过碱基配对原则形成稳定的双链结构。干预mRNA的功能:结合后,这种双链结构可以通过多种机制来阻断mRNA的正常功能。最常见的机制之一是促使mRNA降解。这通常是通过诱导RNaseH酶活性实现的,该酶识别这种双链结构并切割mRNA...