DOPE在阳离子脂质体制备过程中的协同作用原理解析
6、DOPE在阳离子脂质体制备过程中,还能调控膜的流动性及脂质体的生物降解性。适当的膜流动性有利于阳离子脂质体与带负电的细胞膜之间形成融合孔道,使得包裹的内容物得以顺利释放。而良好的生物降解性则是确保脂质体在完成释放任务后能够被机体有效清除,避免长时间滞留体内造成潜在毒性或炎症反应。因此,DOPE的加入可使...
百萤课堂之Annexin V-mFluor 570蓝色标记实验方案
1.用膜联蛋白V缀合物制备和孵育细胞:1.1制备膜联蛋白V结合测定缓冲液:10mMHEPES,140mMNaCl和2.5mMCaCl2,pH7.4。1.2用测试化合物处理细胞一段所需的时间(用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时)以诱导细胞凋亡。1.3离心细胞,得到1-5×105个细胞/管。1.4将细胞重悬于200μL膜联蛋白V结合测定缓冲液中...
【会员先锋】首篇文章即顶刊! 90后博士开辟“神仙”实验室新方向
再加上在前期样品处理的过程中,涉及把蛋白从细胞膜上分离的步骤,很容易丢失重要的信息。为此,张衡引入了脂质纳米盘的方法。纳米盘是由磷脂和膜支架蛋白颗粒组装而成的盘状磷脂双分子层,可以模拟天然的磷脂双分子层膜环境。在纳米盘的环境中,NET的二聚体结构清晰可见。NET二聚体结构其次是实验室前期在基础研究...
mRNA药物制备的关键技术——切向流过滤的高效应用
传递进入细胞:为了确保mRNA药物有效进入患者细胞内,需要一种有效的传递系统如脂质纳米颗粒(LNP),对其进行包裹保护,防止mRNA在到达作用部位前被酶解或无法穿透细胞膜。蛋白质合成:一旦mRNA进入细胞,它就会被细胞的蛋白质合成机制识别,并指导细胞合成所需的治疗性蛋白质。三、TFF技术在mRNA药物制备中的应用1、mRNA生产...
Nature Methods | 光遗传学新突破:控制单分子释放的创新方法
近紫外线照射(Near-UltravioletIllumination):在实验中,研究者通过短暂的近紫外光脉冲照射细胞,触发PhoCl的裂解,导致与其融合的目标蛋白从高尔基体释放到细胞质或细胞膜。单分子成像(Single-MoleculeImaging):释放的目标蛋白可用于单分子成像研究。研究者利用这种方法,能够在单分子水平上观察和分析蛋白质在活细胞中的行...
上海交大邓楠楠课题组发表用于人工细胞的新型多功能细胞骨架文章
其基本原理是通过液滴微流控技术制备水包油包水(W/O/W)乳液,以该复合液滴为模板,在表面张力的作用下发生退浸润(Dewettingtransition),形成liposomes(www.e993.com)2024年10月27日。为了构建仿生细胞骨架,作者将单宁酸(TA)溶于内相,Fe(acac)3溶于油相,TA与Fe将会在油水界面发生交联反应。在形成liposomes的同时,原位地在磷脂双层膜下组装金属-...
膜融合纳米颗粒的HLA多肽寻址通用TCR-T细胞治疗实体瘤
体内外实验表明,pHLA-NP可以修饰肿瘤细胞膜上的pHLA,并能被TCR-T细胞特异性杀伤,从而提高抗肿瘤效果。由于遗传的不稳定性,一些肿瘤细胞可以在选择性压力下进行免疫编辑,以减少抗原的内源性呈递。部分肿瘤存在免疫逃逸现象,如HLA下调和新抗原丢失,导致肿瘤细胞表面缺乏T细胞识别靶点。在体外激活和杀伤实验中,仍观察到p...
新抗原TCR-T细胞免疫治疗的当前进展与挑战
Tcellantigendiscoveryviatrogocytosis开发了一个基于细胞的选择平台,通过利用一种称为巨噬细胞增多的膜转移现象来发现T细胞抗原。当T细胞将NHS-生物素标记的表面蛋白转移到同源靶细胞时,后者可以通过流式细胞术进行鉴定和分选用于肽序列测序。此外,一个称为信号和抗原提呈双功能受体(SABRs)的嵌合受体群为TCR配体...
从有毒气体到生命守护者,这位药理学家为一氧化氮正名
将乙酰胆碱注射到动物体内可引起血管扩张和血压下降现象,因此他推测乙酰胆碱可引起血管中肌细胞舒张,从而增加血管直径。弗奇戈特让学生用体外实验验证这一推测,他们制备出一系列血管条,然后使用乙酰胆碱处理;如果血管条变长则意味着肌细胞舒张,奇怪的是结果重复性极差,更多情况下出现血管条变短现象,和预期完全相反,对这...
神经退行性疾病|FIDA分子互作与Label free技术表征合集
为了阐明与细胞膜结合的aSOs的细胞膜破坏性相互作用,制备了由DOPG脂质制成的模拟膜脂质体,并使用FIDA对其进行相互作用检测。在测量之前,将aSO-Alexa488和DOPG脂质体共孵育15分钟,随后在周围溶剂中用相应浓度的脂质体样品进行分析。得到了aSOs-Alexa488与DOPG脂质体结合后的Rh作为DOPG脂质浓度的函数。(c)表...