分子互作|蛋白与蛋白、核酸、小分子互作检测技术介绍、应用及资料...
原理DNA/RNAPulldown技术是通过生物素标记的DNA或者RNA探针先和Streptavidin琼脂糖珠/磁珠结合,再与细胞裂解液进行孵育,形成磁珠-核酸探针-蛋白复合物,再对蛋白进行洗脱和鉴定。??技术特点能够真实的反映细胞内蛋白质和核酸的结合情况;实验操作简单;不需要特殊仪器。??实验步骤1、探针固定:生物素标记的D...
RNA技术在基因编辑、RNAi等领域的应用
01已知RNA,寻找与之相互作用的蛋白质,例如RNApull-downRNApull-down方法中,首先利用体外转录得到标记有生物素的RNA探针,然后将RNA探针与蛋白提取液共同孵育,形成RNA-蛋白质复合物,再利用链霉亲和素磁珠纯化得到复合物,洗脱后通过WesternBlot等方法检测相互作用。针对体外转录部分,近岸蛋白提供兼容长链和短链RNA...
Pull-down实验技术交流--唯问生物Justscience
RNAPull-down,GSTPull-down,DNAPull-down;分子互作,蛋白-蛋白互作,蛋白-DNA互作,蛋白-RNA互作。有需要?找唯问!特别声明:以上内容(如有图片或视频亦包括在内)为自媒体平台“网易号”用户上传并发布,本平台仅提供信息存储服务。Notice:Thecontentabove(includingthepicturesandvideosifany)isup...
DNA pull down试剂盒
该技术将生物素标记的DNA片段结合在链霉亲和素磁珠上,再与细胞核蛋白孵育,纯化出与DNA片段互作的蛋白,洗涤洗脱得到的蛋白产物,做western-blot检测特定蛋白是否与靶DNA片段结合;做质谱鉴定即可筛选出与DNA片段可能互作的蛋白信息(如具体某个或某些转录因子/组蛋白等)。DNAPULLDOWN实验流程产品描述:广州如期生物技...
傻傻分不清?DNApull-down来啦!
一、原理概述DNApull-down是体外研究DNA与蛋白互作的有力工具。该技术将生物素标记的DNA片段结合在链霉亲和素磁珠上,再与细胞核蛋白孵育,纯化出与DNA片段互作的蛋白,洗涤洗脱得到的蛋白产物,做western-blot检测特定蛋白是否与靶DNA片段结合;做质谱鉴定即可筛选出与DNA片段可能互作的蛋白信息(如具体某个或某些转录因...
...海军军医大学杨彦勇/高福/蔡建明??发现同源重组介导的 DNA...
该研究通过在ANRIL-KD细胞中过表达ATR进行拯救实验,并在ANRIL-OE细胞中进行ATR敲低来改变ATR的表达(www.e993.com)2024年9月7日。数据显示,ANRIL-KD细胞中的ATR过表达显著提高了DNA修复和细胞存活的功效。然而,ANRIL-OE细胞中的ATR敲低抑制了DNA修复和细胞存活。这些结果表明ANRIL直接结合并保护ATR免受泛素...
核酸蛋白互作:RNA/DNA pull down,CHIRP
其中,RNA/DNApulldown是研究体外条件下RNA或DNA与蛋白互作的重要技术。该技术通过体外转录目的RNA的一部分或全长,用生物素标记转录产物,再与链霉亲和素磁珠孵育使之固定在磁珠上,用以“pulldown”互作蛋白,纯化的产物蛋白经特定抗体的western-blot实验,可验证某种蛋白与目的RNA/DNA是否有相互作用;纯化的蛋白经质...
Nature子刊Oncogene:国自然热点之“外泌体糖基化”研究该如何开展...
通过将细胞裂解物与链霉亲和素包被的磁珠一起孵育,将生物素偶联的RNA复合物拉下,进行RNApull-down测定。通过qRT-PCR评估捕获组分中circSPIRE1、GALNT3或QKI的富集。结合的蛋白质从填充的珠子上洗脱下来,并通过SDS-PAGE进行分析。捕获复合物中的蛋白质通过蛋白质印迹或银染或质谱分析进行鉴定。