人类/小鼠的肝脏、胰腺类器官培养建立及基因操作(下)
(vi)去上清,用450??l合适的培养基(即人肝分离培养基或小鼠肝分离培养基)重悬沉淀。将混合物放在冰上直到转染。(vii)Lipofectamine和DNA的制备。每种转染条件下,在两个1.5ml的微离心管中各加入50??lOpti-MEM。在一根试管中加入1??l0.8??g/??l的DNA,在另一根试管中加入4??lLipofe...
活体转染应用第七弹之玻璃体注射
VCAM-1敲除小鼠由于胎盘发育缺陷导致胚胎致死,所以这里作者使用玻璃体内注射VCAM-1siRNA来评估VCAM-1缺失对OIR(氧诱导视网膜病变)诱导的小鼠病理性视网膜血管生成的重要性。我们在P12和P14时进行玻璃体内注射0.5μl含有in-vivojetPEI??转染试剂和1μg对照或VCAM-1siRNA的5%葡...
Nature Med.丨Leber先天性黑矇10型的新希望,新曙光
二、建立CEP290IVS26基因突变敲入小鼠模型建立CEP290IVS26基因突变敲入小鼠模型,在小鼠模型视网膜下注射EDIT-101,观察剂量效应和药代动力学,检测到迅速并且持久的基因编辑效果,而且总体CEP290基因编辑率与SaCas9mRNA和gRNA均相关(图2)。图2.HuCEP290IVS26敲入小鼠的体内编辑效果。a.不同浓度EDIT-101在小鼠...
Science丨吗啡为什么能镇痛?从RVM到脊髓的调控网络
这种热刺激可以引起小鼠的疼痛感知反应,从而评估其热觉敏感性。除了热板实验,研究人员还使用了Hargreaves热刺激实验来评估小鼠的热觉敏感性。研究团队利用Hargreaves热刺激实验用以评估小鼠的热觉敏感性。他们首先将小鼠放置在一个透明的塑料箱中,箱底为玻璃板,玻璃板下方放置一个辐射热源,用于照射小鼠的后爪。实验人员记...
同济大学合作发文:发现肝癌治疗新策略
TRIM65促进小鼠肝癌的发生02为了阐明TRIM65的生物学功能,研究人员将靶向TRIM65的小干扰RNA(sirna)转染到肝癌细胞(SNU449和SNU398)中。结果表明,TRIM65缺陷显著抑制细胞增殖,减弱细胞生长和克隆形成能力,并将细胞周期阻滞在G0-G1期。同时,沉默TRIM65表达可诱导细胞凋亡。异种移植模型表明TRIM65促进体内肝癌的成瘤。
疫苗前沿 | 一种新型冠状病毒类病毒结构疫苗的成药可能性
目的探讨新型冠状病毒类病毒结构疫苗中的mRNA和蛋白使用剂量对小鼠免疫效果的影响,以期确定最佳的mRNA和蛋白使用剂量及成药可能性(www.e993.com)2024年10月3日。方法用ADT-脂质纳米颗粒递送系统装载和包封不同剂量的蛋白和mRNA,转染不同细胞系检测相应抗原表达情况,以及免疫动物检测血清的特异性抗体效价。
LNP可作为mRNA疫苗递送载体的又一证据:可以实现mRNA 免疫原性的调节
在用大多数制剂转染的细胞中体外检测到RBD蛋白,而在C57BL/6小鼠中,只有两个LNP原型(mLNP和LNP-1)递送的RBD-mRNA引发了针对原始祖先SARS-CoV-2菌株和不同关注变体(VoC)的SARS-CoV-2特异性结合和中和抗体。这两种纳米载体完全保护了易感转基因K18-hACE2小鼠在SARS-CoV-2攻击后的...
动物行为与电生理专题丨化学遗传学方法结合动物脑电记录
采用化学遗传方法调控CA3脑区锥体神经元活性,使用rAAVCaMKIIa-hM4D(Gi)-mCherry病毒进行化学遗传调控,该病毒携带CaMKIIa启动子,能特异性地在锥体细胞上转染hM4D(Gi),hM4D(Gi)是一种改造的毒蕈碱乙酰胆碱受体,能与CNO特异性结合,抑制神经元活动。mCherry是红色荧光蛋白标签。干预组小鼠CA3区注射rAAV-CaMKIIa-hM4D...
诺唯赞2023年年度董事会经营评述
为满足客户在生命科学领域对细胞类试剂与蛋白类试剂日益增长的性能需求和质量稳定性需求,公司积极响应市场需求,重点拓展细胞/蛋白产品线的业务,在细胞转染、蛋白免疫及细胞培养方面均取得突破性进展,推出多款品质优良、质量稳定的新产品:①公司全方位提升脂质体转染试剂在细胞兼容性、转染效率与细胞毒性等方面的性能,推出...
LNP递送mRNA实现胎儿脑内基因编辑
早前来自宾大研究团队的一篇研究论文“IonizablelipidnanoparticlesforinuteromRNAdelivery”,就已在怀孕小鼠中验证了其筛选的LNP可安全实现子宫内递送mRNA,通过脐静脉注射成功递送mRNA至围产期小鼠胎儿肝脏,肺和肠道中,并实现较高的转染效率,但该研究还未验证其在中枢神经系统中的递送效率。