新型FRET肽测定:揭示锌和铜结合在抑制幽

观察蛋白质时可以用考马斯亮蓝G250染色。独立实验至少要做四次。?——·热位移测定——?测热泳动分析,看重组HpHtrA蛋白(野生型、S164A、D165A、S166A、D168A)在氧化锌浓度增加或氯化铜2存在下的熔化温度变化,这能表明蛋白是稳定还是不稳定,也就是Zn或Cu与HpHtrA结合的证据。

Western Blotting--蛋白浓度测定

Bradford法(考马斯亮蓝法)是在酸性条件下,加入考马斯亮蓝G250与蛋白质(主要是碱性或芳香族氨基酸)结合为蓝色化合物,吸光度值从465nm变成595nm,最后测定595nm的OD值来计算蛋白质浓度,Bradford法会受到高浓度去垢剂的干扰。双缩脲法或Folin法由于检测灵敏度不够高,已被BCA法或Bradfor...

蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE,polyacrylamide gel...

4.考马斯亮蓝G250染色液:称100mg考马斯亮蓝G250,溶于200ml蒸馏水中,慢慢加入7.5ml70%的过氯酸,最后补足水到250ml,搅拌1小时,小孔滤纸过滤。6.1%琼脂7.鸡血清(二)器材电泳仪、垂直板电泳槽,微量加样器、长针头注射器、烧杯、试管、滴管、平皿等。实验方法(一)电泳装置的安装夹心式垂直...

微型光纤光谱仪可以应用于哪些领域?

譬如,Bradford法测蛋白质,这是基于让染料分子(考马斯亮蓝G250)与蛋白质结合成复合体,该复合体在595nm有最大吸收峰,这种方法的好处是待测蛋白质样品中可能含有的K+,Na+,Mg2+,(NH4)2SO4,乙醇等杂质不会干扰蛋白质测定。BCA法则是利用蛋白质的化学性质,即在碱性条件下蛋白质可以与Cu2+发生络合反应,并将Cu2+...

WB 如何一分钟蛋白定量?师姐秘籍

是在酸性条件下,加入考马斯亮蓝G250与蛋白质(主要是碱性或芳香族氨基酸)结合为蓝色化合物,吸光度值从465nm变成595nm,最后测定595nm的OD值来计算蛋白质浓度。双缩脲法或Folin法由于检测灵敏度不够高,早已被BCA或Bradford法所代替。