...安徽工程大学张琴教授等:过表达去饱和酶基因对大肠杆菌脂肪酸...

重组表达质粒pET-28a-de1、pET-28a-de2、pET-28a-de抽提纯化,分别采用限制性内切酶EcoRI/XhoI、BamHI/XhoI、BamHI/XhoI双酶切,琼脂糖凝胶电泳结果显示,各重组表达质粒酶切后均产生两条带(图2),其中大片段均与质粒pET-28a单酶切片段长度一致,小片段分别与de1、de2、de基因的目的片段长度一致,进一...

和元生物获得发明专利授权:“一种提高大肠杆菌裂解过程中质粒稳定...

具体步骤如下:1)菌体重悬,所述重悬液含二糖类化学物质;2)碱裂解;3)中和;4)澄清;5)浓缩换液;6)分子筛层析;7)制剂换液。本发明的工艺简便,通过在菌体重悬液中添加一定浓度的二糖(如蔗糖、海藻糖等),保护大肠杆菌碱裂解过程中的超螺旋质粒,进而简化下游层析纯化工艺,并提高质粒回收率,方便快捷,适于推广应用。

《食品科学》:南阳师范学院唐存多副教授等:大肠杆菌L-苏氨酸脱氢...

本研究从E.coli中克隆出L-TDH的基因片段,再借助pACYCDuet-1表达质粒在E.coliBL21(DE3)中实现了高水平的可溶性表达,酶活力测定结果表明,E.coliBL21(DE3)/pACYCDuet-1-Ectdh发酵液中L-TDH活力可达19.13IU/mL,纯化后重组L-TDH的比活力为12.77IU/mg。与已报道文献相比,本研究表达水平和比活力均较高,...

【新品速递】Tobitec Ecoli CD培养基——国内首款专为mRNA药物设计

专为支持大肠杆菌高密度培养,质粒高质量生产而设计的一种微生物发酵培养基,可以满足大肠杆菌的高密度扩增和质粒高质量生产时的营养需求。适合DH5α、BL21(DE3)、Stbl3、DH10B等不同菌株的培养。用于质粒扩增过程中的关键环节,提供了高效、精确且可重复的培养环境,帮助提升质粒的产量和质量,为mRNA药物的制备提供强有...

...烯类抗生素的质粒竟能在革兰氏阴性菌和阳性菌之间广泛地来回穿梭

那携带耐碳青霉烯类抗生素基因的pX3_NDM-5质粒,究竟从大肠杆菌体内转移到那些细菌中了呢?基因测序结果显示,携带pX3_NDM-5质粒的细菌竟然分布于16个门,包括革兰氏阳性菌和一些难培养细菌。其中,pX3_NDM-5质粒可以在三种粪肠球菌中稳定存在长达15天之久。这一发现颠覆了研究人员对此类质粒的认知,毕竟在传统认知...

颠覆大肠杆菌地位?创新微生物引领合成生物实验新潮流

然而,研究人员创造的这个新的微生物,不仅有望与大肠杆菌在实验室中展开激烈的竞争,更可能彻底重塑生物学的研究范式,为合成生物学的发展提供一种经济高效、可扩展的全新路径(www.e993.com)2024年11月19日。(注:模式生物是指在生物学研究中被广泛使用的实验生物,通过使用模式生物,科学家们可以深入研究生命现象的各个方面,如基因表达、蛋白质功能、...

综述:细菌群落中抗菌药物耐药基因的水平转移

同样，据报道，亚抑制浓度的四环素（1毫克/升）和强力霉素（1毫克/升）可显著增加DM0133、RP4和pEC292质粒在大肠杆菌菌株间的转移，而这是基于一项在整个实验过程（48小时）中都存在接合作用的研究。此外，庆大霉素和万古霉素可使金黄色葡萄球菌中质粒pWG613的转移频率增加10-20倍，为支持庆大...

pCMV-N-Flag-BioID2 (邻近蛋白生物素标记质粒)

表达和标记:转化表达宿主细胞,如大肠杆菌(E.coli),进行蛋白表达,并利用生物素标记的标记剂标记邻近蛋白。应用:用于分析蛋白质与其他生物分子(如蛋白质、RNA或DNA)之间的相互作用,例如通过近距离的免疫沉淀、共沉淀或荧光显微镜等技术。这种质粒的应用广泛,可用于分子生物学、细胞生物学和生物化学研究中,特别是在...

一个划时代的里程碑

而mRNA的生产方式目前则更加适合大规模生产:直接将批量将病毒DNA转进质粒中,将质粒导入大肠杆菌,然后培养扩增大肠杆菌,只需要四天的培养发酵,然后就可以分解大肠杆菌,分离纯化获得DNA,然后再经过人工转录的过程,将DNA变成RNA,转录的过程只需要数小时。最后也是非常关键的技术壁垒:将mRNA加入与脂质纳米粒(LNP)结合,使其...

基因治疗领域的创业示例-Ginkgo Bioworks公司

sequence-肽序列Saccharomycescerevisiae-酿酒酵母Metabolicengineering-代谢工程Plasmid-质粒Polyketide-聚酮化合物Mutant-突变体Yarrowia-耶氏酵母属Aminoacid-氨基酸ATPsynthase-ATP合成酶Cellbiology-细胞生物学Fattyacid-脂肪酸Metabolism-代谢Microbiology-微生物学Proteinstructure-蛋白质结构Geneexpression-基因表达...