Nature重磅综述 |关于RNA-seq,你想知道的都在这
在short-readRNA-seq建库前利用唯一分子标识符(UMI)标记cDNA分子,从而解决短读长问题做到测序全长mRNA。基于这个技术可以对长达4kb的转录本异构体进行鉴定和定量。从根本上解决short-cDNA测序固有限制的最有效的方法还是long-readcDNA测序和dRNA-seq方法。long-readcDNA测序尽管Illumina是目前主流的RNA-seq...
2025天津医科大学《810生物学基础》全国硕士研究生入学统一考试大纲
2、方向的单向性---半不连续合成(前导链,随从链和冈琦片段)3、引物的依赖性---引物酶,引发体和引物4、底物的特异性---dNTP5、复制校读功能---复制的忠实性6、功能的局限性---DNA连接酶7、原核细胞与真核细胞DNA聚合酶的异同(五)DNA复制的基本过程1、复制的启始2、复制的延伸3、复制的终...
Nature:颜峻等人发现内源小RNA结合蛋白La,可全面改进先导编辑
先导编辑(PE)系统由两部分组成:一个含有DNA切口酶(nickase)和工程逆转录酶(RT)的融合蛋白;另一个是PE向导RNA——pegRNA。pegRNA包含一个指定目标位点的间隔体(spacer),一个单向导RNA(sgRNA)支架和一个编码所需编辑的3'端扩展。该3'端扩展包含一个引物结合位点(PBS),它是互补的一部分DNA原间隔和一个RT模板,...
测序读长达25000碱基,准确性达99.9%之后,PacBio如何开启下一步破局?
首先,HiFi的测序文库十分特别,在线状的DNA片段两端,插入发夹型衔接子,形成一个环状的模板。其次,将引物和聚合酶添加到这个模板上,形成DNA复合物。这样建库的好处是,由于DNA片段形成了一个完整的圆环,就能够对其进行周而复始的滚换复制、滚环测序,从而提高测序的准确度。SMRTcell芯片是HiFi测序的核心,用于在PacBio长...
气死!老板说做完克隆就放假,我两眼一睁就是 p,却颗粒无收
复孔重复性差可能是加样操作的问题;而基因克隆需要用高保真酶来确保扩增片段的准确性,常规的DNA聚合酶达不到这么高的要求。师姐可以试一下我最近免费申请的即用型超保真PCR预混试剂,使用时只需加入DNA模板和引物,最大限度地减少人为误差,而且可以确保扩增片段的准确性!
儿童肺炎支原体抗体和核酸均阳性,需要抗肺炎支原体治疗吗?
肺炎支原体DNA核酸检测:主要针对肺炎支原体的基因组DNA进行检测(www.e993.com)2024年10月16日。这种检测通常使用聚合酶链反应(PCR)技术,通过特定的引物针对肺炎支原体的DNA进行扩增和检测。肺炎支原体RNA核酸检测:主要检测肺炎支原体的RNA,尤其是其mRNA。这种检测可以使用逆转录聚合酶链反应,首先将RNA逆转录为cDNA,然后再进行PCR扩增和检测。
东北农业大学张微副研究员等:CRISPR/Cas-等温扩增技术
Cas14效应蛋白作为由RNA引导的DNA核酸酶,可在crRNA和tracrRNA的指导下通过RuvC识别并切割ssDNA,正是由于Cas14效应蛋白极小的体积,在切割ssDNA时不需要特定的PAM序列,对于DNA的单核苷酸多态性(SNP)的特异性更高。此外,在识别靶标DNA的同时也展示了其对ssDNA的附带切割活性,这些特征使Cas14效应蛋白在生物传感方面展现出...
无论你是“E人”或是“I人”,今天我们都是“P人”
1、普通基因表达水平的检测:能够快速准确的定量出相关基因在不同组织或生命状态下的相对表达水平,例如:CKO小鼠敲除效率的检测。2、基因拷贝数的检测:能够准确的定量出相关基因在染色体中的拷贝数。3、特殊RNA的转录水平检测:根据特殊RNA的结构,如microRNA、circRNA等,设计其特殊引物,如茎环结构引物、反向引物等,对...
针对传染病的mRNA疫苗权威综述:诺奖得主德鲁·韦斯曼万字长文
图4|信使RNA疫苗通过转染抗原呈递细胞来引发免疫反应。(1)注射的mRNA疫苗被抗原呈递细胞吞噬。(2)mRNA在逃离内质网并进入细胞质后,由核糖体翻译成蛋白质。翻译后的抗原蛋白可以通过多种方式刺激免疫系统。(3)细胞内抗原被蛋白酶体复合物分解成较小的片段,这些片段通过主要组织相容性复合物(MHC)I类蛋白在细胞表面呈现...
华大智造2023年年度董事会经营评述
以实现对单细胞水平DNA与蛋白质互作信息的研究;发布了细胞液滴生成仪DNBeabC-TaiM4(泰山),其配备4个独立控制的微流控通路,同时兼容单细胞ATAC文库和3’RNA文库制备需求,支持1-4个样本的灵活上样,延续了公司单细胞产品小巧轻便、即开即用的优点;此外,公司还优化了单细胞RNA捕获系统,提升单细胞RNA捕获磁珠和建库...